Научная тема: «FRANCISELLA TULARENSIS: НЕКОТОРЫЕ АСПЕКТЫ ЭКОЛОГИИ И ДИАГНОСТИКИ»
Специальность: 03.00.07
Год: 2008
Отрасль науки: Биологические науки
Основные научные положения, сформулированные автором на основании проведенных исследований:

1. Возбудитель туляремии под воздействием стрессовых условий окружающей среды способен обратимо переходить в некультивируемое состояние, что должно обеспечивать ему возможность персистировать в окружающей среде в межэпизоотический период. Полученные ревертанты некультивируемых форм туляремийного микроба сохраняют свои основные дифференциально-диагностические свойства, в том числе и вирулентность. Факт существования некультивируемых форм туляремийного микроба имеет прямое отношение к резервации возбудителей и их адаптации к неблагоприятным условиям среды.

2. Возбудитель туляремии наделен исключительно важной для персистенции адаптивной пластичностью, что проявляется в его адекватной реакции на стрессовые факторы окружающей среды. Возбудитель туляремии способен к индукции стрессового ответа in vivo и in vitro, который сопровождается заметной перестройкой его метаболизма и структуры хромосом.

3. С помощью современных молекулярно-генетических технологий, включающих клонирование, зондирование и ПЦР-анализ подобран комплекс молекулярно-биологических методических приемов для обнаружения и идентификации возбудителя туляремии. Сконструированный ДНК-зонд, а также полученные на его базе специфические праймеры позволяют выявлять туляремийный микроб в ПЦР как в чистой культуре, так и в смеси культур с другими микроорганизмами. ОП-ПЦР с универсальными праймерами позволяет осуществлять генотипический скрининг штаммов туляремийного микроба, идентификацию штаммов на межродовом и внутривидовом уровне и демонстрировать их генетическое разнообразие.

4. ПЦР-анализ в силу своей чувствительности и специфичности позволяет использовать его в качестве надежного инструмента в системе эпидемиологического надзора за туляремией. Применение ПЦР в комплексе с бактериологическим и иммуно-серологическими методами, а также криоконсервированием при исследовании различных компонентов паразитарной системы и абиотических объектов позволяет оперативно получать эпидемиологически значимую информацию, необходимую для углубленного суждения об эпидемическом потенциале природного очага или защиты общества от угрозы биологического нападения.

Список опубликованных работ
1. Авторское свидетельство Госкомитета СССР по делам изобретений и открытий № 1669981 Рекомбинантная плазмидная ДНК-источник зонда для тестирования представителей рода Francisella. Штамм E.coli JM 103 pRD 6RM7-продуцент рекомбинантной плазмиды / Романова Л.В., Павлович Н.В., Мишанькин Б.Н. - Зарегистрировано в Гос. реестре изобретений СССР 15.04.1991.

2. Павлович, Н.В. Сравнительная характеристика биологических свойств штаммов F.tularensis, выделенных на территории СССР / Н.В. Павлович, Б.Н. Мишанькин, Н.К. Тынкевич, И.В. Рыжко, Л.В. Романова, Г.И. Данилевская // Антибиотики и химиотерапия. - 1991. - Т. 36. - № 10. - С. 23-25.

3. Романова, Л.В. Использование полимеразной цепной реакции для генотипического скрининга штаммов F.tularensis / Л.В. Романова, И.Ю. Сучков, Б.Н. Мишанькин // Актуальные проблемы профилактики туляремии: Тез. докл. Всесоюзн. конф. - Симферополь, 1991. - С. 160-161.

4. Романова, Л.В. ДНК-зонд для обнаружения возбудителя туляремии / Л.В.Романова, Н.В. Павлович, Б.Н. Мишанькин // Актуальные проблемы профилактики туляремии: Тез. докл. Всесоюзн. конф. - Симферополь, 1991. - С. 162-163.

5. Романова, Л.В. ДНК-зонд для идентификации представителей рода Francisella / Л.В.Романова, Н.В. Павлович, Б.Н. Мишанькин // Биотехнология. -1992. -№ 4. - С. 52-55.

6. Романова, Л.В. Полимеразная цепная реакция: генотипический скрининг штаммов Francisella tularensis с использованием универсальных праймеров / Л.В. Романова, И.Ю. Сучков, Б.Н. Мишанькин // Биотехнология. - 1993. - № 6. - С. 8-9.

7. Романова, Л.В. Анализ ДНК штаммов Brucella sp. в полимеразной цепной реакции с использованием универсальных праймеров / Л.В. Романова, Б.Н. Мишанькин // Биотехнология. - 1994. - № 4. - С. 8-10.

8. Романова, Л.В. ПЦР-детекция представителей рода Francisella / Л.В. Романова, И.Ю. Сучков, Б.Н. Мишанькин // Актуальные проблемы разработки мед.средств и методов сохранения и восстановления боеспособности личного состава вооруженных сил: Тез. докл. - Санкт-Петербург, 1994. - С. 127.

9. Романова, Л.В. Использование полимеразной цепной реакции для генотипического скрининга Y.pestis / Л.В. Романова, Б.Н. Мишанькин, В.К. Валенцев // Актуальные проблемы особо опасных природно-очаговых инфекционных болезней: Тез. докл. - Иркутск, 1994. - С. 133.

10. Романова, Л.В. Стрессовый ответ у возбудителя туляремии / Л.В. Романова, С.О. Водопьянов, И.Л. Олейников, Б.Н. Мишанькин // Акту-ал. опр.профилакт. чумы и других инф. заболеваний: Матер. межгос. нучно-ракт. конф. - Ставрополь, 1994. - С. 203-204.

11. Романова, Л.В. Праймеры для специфического обнаружения Francisella tularensis в полимеразной цепной реакции / Л.В. Романова, Б.Н. Мишанькин // Журн. микробиол. эпидемиол. иммунобиол. - 1995. - № . -С. 77-80.

12. Romanova, L.V. Polymerase chain reaction species-specific primer set for rapid detection of Francisella tularensis / L.V. Romanova, B.N. Mischankin // Abstract 7th European congress of Clinical Microbiolog and Infectious Diseases-ECCMID-95.- Vienna - Austria. - March 26-30, 1995. - P. 97.

13. Романова, Л.В. ПЦР-генотипувания холерных вiбрiонiв видiленных в Дагестане в 1993-1994 рр. / Л.В. Романова, Б.Н. Мишанькин, Ю.М. Ломов, И.Ю. Сучков // XII зьезд Украiнского наук. товариства миiроб. епiдем. параз. - Кiiв - Винниця, 1996. - С. 55.

14. Романова, Л.В. Полимеразная цепная реакция: детекция и генотипирование представителей рода Francisella / Л.В. Романова, Б.Н. Мишанькин, И.Ю. Сучков // Биотехнология. - 1996. - № 3. - С. 27-32.

15. Романова, Л.В. ПЦР-генотипирование ДНК-содержащих бактериофагов / Л.В. Романова, В.И. Марченков, Т.Н. Бородина, Б.Н. Мишанькин // Биотехнология. - 1997. - № 1. - С. 21-25.

16. Москвитина, Э.А. Эпидемиологический надзор за туляремией с позиций социально-экологической концепции / Э.А. Москвитина, Б.Н. Мишанькин, Н.Л. Пичурина, Н.В. Павлович, Л.В. Романова и др. // Матер. научно-практ. конф. посвящ. 100-лет. образов. противочумной службы России. - Саратов, 1997. - Т.1. - С. 110-111.

17. Романова, Л.В. Продукция основных белков теплового стрессового ответа клетками Francisella tularensis в подкожно имплантированных диффузионных камерах / Л.В. Романова, С.О. Водопьянов, И.П. Олейников, Б.Н. Мишанькин // Матер. научно-практ. конф. посвящ. 100-лет. образов. противочумной службы России. - Саратов, 1997. - Т. 2. - С. 113-114.

18. Романова, Л.В. Стрессовый белок GroEL Francisella tularensis / Л.В. Романова, С.О. Водопьянов, С.Р. Саямов, Б.Н. Мишанькин // Матер. научно-практ. конф. посвящ. 100-лет. образов. противочумной службы России. - Саратов, 1997. - Т. 2. - С. 114.

19. Романова, Л.В. Выявление некультивируемых форм Francisella tularensis с помощью полимеразной цепной реакции / Л.В. Романова, Б.Н. Мишанькин // Матер. научно-практ. конф. посвящ. 100-лет. образов. противочумной службы России. - Саратов, 1997. - Т. 2. - С. 115.

20. Романова, Л.В. ПЦР - в практике эпизоотологического обследования природных очагов туляремии в Ростовской области / Л.В. Романова, Н.Л. Пичурина, Б.Н. Мишанькин // Матер. научно-практ. конф. посвящ. 100-лет. образов. противочумной службы России. - Саратов, 1997. - Т. 2. - С. 213.

21. Romanova, L.V. Francisella tularensis stress protein / L.V. Romanova, S.O. Vodopyanov, S.R. Sajamov, B.N. Mischankin // Vojenske Zdravotniske Listy, Rocnik LXVI, 1997. - N. 1. - P. 18. - Second International Conferens on Tularemia.

22. Mischankin, B.N. Nonculturable forms of Francisella tularensis and their possible epideviological significance / B.N. Mischankin, L.V. Romanova, N.L. Pichurina // Vojenske Zdravotniske Listy, Rocnik LXVI, 1997. - N. 1. - P. 25. - Second International Conferens on Tularemia.

23. Мишанькин, Б.Н. База данных о нуклеотидных последовательностях, используемых в качестве базы данных «Праймеры микроорганизмов» / Б.Н. Мишанькин, Н.Л. Волохонская, Э.А. Москвитина, Л.В. Романова и др. // Журн. микробиол. эпидемиол. иммунобиол. - 1998. - № 5. - С. 39-43.

24. Романова, Л.В. Использование метода ПЦР для детекции Francisella tularensis / Л.В. Романова, Б.Н. Мишанькин, Н.Л. Пичурина // Методические документы и отчеты по сан. - эпид. охране территории РФ. - Саратов, 1998. - С. 24-25.

25. Романова, Л.В. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) в диагностике Francisella tularensis / Л.В. Романова, Б.Н. Мишанькин, Н.Л. Пичурина // Полимеразная цепная реакция в диагностике и контроле лечения инфекционных заболеваний: Матер. II Всерос. конф. 20-22 января 1998 г. -Москва, 1998. - С. 112-113.

26. Мишанькин, Б.Н. Туляремия / Б.Н. Мишанькин, Н.В. Павлович, Л.В. Романова, И.Я. Черепахина и др. // Лабораторная диагностика возбудителей особо опасных инфекционных болезней. - Саратов. - 1998. - Т. 1. - С. 111-143.

27. Орехов, И.В. Фауна переносчиков, как составная часть паразитарной системы природных очагов туляремии в Ростовской области / И.В. Орехов, А.В. Родионов, В.Г. Налетов, Б.Н. Мишанькин, Э.А. Москвитина, Н.Л. Пичурина, Л.В. Романова // Природноочаговые инфекции в России: Современная эпидемиология, диагностика, тактика защиты населения: Матер. Всесоюзн. научно-практ. конф. - Омск, 1998. - С. 150-151.

28. Кадетов, В.В. ПЦР - диагностика криоконсервированного полевого материала / В.В. Кадетов, Н.Л. Пичурина, Л.В. Романова, В.Г. Налетов и др. // Природноочаговые инфекции в России: Современная эпидемиология, диагностика, тактика защиты населения: Матер. Всесоюзн. научно-практ. конф. - Омск, 1998. - С. 156-157.

29. Романова, Л.В. Применение ПЦР в генотипической характеристике холерных бактериофагов / Л.В. Романова, Т.А. Кудрякова, Л.Д. Македонова, Г.В. Качкина и др. // Генная диагностика особо опасн. инф.: Матер. I-ой Всерос. научно-практ. конф. - Саратов, 2000. -С. 31-33.

30. Романова, Л.В. Некультивируемые формы Francisella tularensis: условия получения и реверсии в исходное состояние / Л.В. Романова, Б.Н. Мишанькин, Н.Л. Пичурина, С.О. Водопьянов и др. // Журн. микробиол. эпидемиол. иммунобиол. - 2000. - № 2. - С. 11-15.

31. Романова, Л.В ПЦР и проблема некультивируемых форм Francisella tularensis / Л.В. Романова, Б.Н. Мишанькин, Н.Л. Пичурина // Инфекционные болезни: диагностика, лечение, профилактика: Матер. VI Российско-Итальянской науч. конф. - Санкт Петербург, 2000. - С. 215.

32. Пичурина, Н.Л. Совершенствование тактики лабораторных исследований при эпизоотологическом мониторинге природных очагов туляремии / Н.Л. Пичурина, Э.А. Москвитина, Б.Н. Мишанькин, Л.В. Романова, С.А. Гавринев, В.В. Баташов и др. // Инфекционные болезни: диагностика, лечение, профилактика: Матер. VI Российско-Итальянской науч. конф. -Санкт Петербург, 2000. - С. 197.

33. Romanova, L.V., Kudryakova T.A., Makedonova L.D., Kachkina G.V., Mischankin B.N. Genotyping of Vibrio cholerae bacteriophages using arbitrary primer polymerase chain reaction (AP-PCR) / L.V. Romanova, T.A. Kudryakova, L.D. Makedonova, G.V. Kachkina, B.N. Mischankin // The 9th International Congress for Culture Collection (ICCCI). - Brisbane.-Australia, 2000. - P. 105.

34. Мишанькин, Б.Н. Туляремия: перспективы использования полимеразной цепной реакции при эпидемиологическом надзоре / Б.Н. Мишанькин, Э.А. Москвитина, Н.Л. Пичурина. Л.В. Романова и др. // Актуальные вопросы особо опасных инфекций. - Нальчик, 2000. - С. 49-51.

35. Romanova, L.V. Transfer of Francisella tularensis to the nonculturable state: indaction and condition favourable for reversion / L.V. Romanova, B.N. Mischankin, N.L. Pichurina // The 3-rd International Conference on Tularemia. - Umea. - Sweden, 2000. - P. 25.

36. Романова, Л.В. Осмотический стресс у возбудителя туляремии / Л.В. Романова, Н.Я. Шиманюк, Т.Г. Мордвинцева, Б.Н. Мишанькин // Эпидемиологический надзор и социально-гигиенический мониторинг: Матер. Российской научно-практ. конф. - Москва, 2002. - С. 83.

37. Москвитина, Э.А. Компьтерные базы данных для эпизоотического и эпидемического процессов при туляремии / Э.А. Москвитина, Г.Б. Анисимова, Н.Л. Пичурина, Б.Н. Мишанькин, И.В. Орехов, С.Ю. Водяницкая, Д.А. Феронов, Л.В. Романова // Эпидемиологический надзор и социально - гигиенический мониторинг: Матер. Российской научно - практ. конф. - Москва, 2002. - С. 67-68.

38. Орехов, И.В. Особенности фаунистической структуры паразитарных систем некоторых природно-очаговых инфекций в условиях крупного города / И.В. Орехов, Э.А. Москвитина, Б.Н. Мишанькин, Н.Л. Пичурина, А.Д. Линкович, В.И. Адаменко, С.Ю. Водяницкая, Л.В. Романова и др. // Проблемы особо опасных инфекций. - 2002. - Вып. 1/83. - С. 64-72.

39. Romanova, L.V. Influence of osmotic stress on Francisella tularensis / L.V. Romanova, N.Ya. Shimanyek, T.G. Mordvintseva, B.N. Mishankin // Fourth International Conference on Tularemia. The Assembly Room, City of Bath, Romsey. - UK, 2003. – P. 10.

40. Романова, Л.В. Место ПЦР в эпидемиологическом мониторинге природных очагов туляремии Ростовской области / Л.В. Романова, Н.Л. Пичурина, Э.А. Москвитина, С.Ю. Водяницкая и др. // Современные технологии в диагностике особо опасных инфекционных болезней: Матер. 4-й Межгосударст. научно-практ. конф. государств - участников СНГ. - Саратов, 2003. - С. 157-160.

41. Романова, Л.В. Тепловой стресс и белок теплового стресса GroEL у возбудителя туляремии / Л.В. Романова, С.О. Водопьянов, С.Р. Саямов, И.П. Олейников и др. // Биотехнология. - 2004. - № 5. - С. 33-39.

42. Романова, Л.В. Солетолерантность и осмотический (солевой) стресс у возбудителя туляремии / Л.В. Романова, Н.Я. Шиманюк, С.Р. Саямов, А.К. Киселева и др. // Биотехнология. - 2004. - № 6. - С. 27-33.

43. Романова, Л.В. Изучение солевого стресса туляремийного микроба с помощью ОП-ПЦР / Л.В. Романова, Б.Н. Мишанькин // Медицинская микробиология - XXI век: Матер. Всеросс. научно-практ. конф. - Саратов, 2004. - С. 192.

44. Романова, Л.В. Возбудитель туляремии: современные аспекты экологии и диагностики / Л.В. Романова, Б.Н. Мишанькин // Чрезвычайные ситуации международного значения в общественном здравоохранении в решениях Санкт - Петербургского саммита «Группы восьми» и санитарная охрана территорий государств - участников Содружества Независимых Государств: Матер.VII Межгосударств. научно-практ. конф. Оболенск, 2006. - С. 119-120.