- При очистке основных типов гемоглобина наиболее эффективны методы фракционирования, основанные на разделении по изоэлектрической точке: ионообменная хроматография и препаративный электрофорез. При электрофоретическом разделении гемоглобинов оптимальным является диапазон рН рабочего буфера от 6,0 до 6,6. Значительное влияние на электрофоретическую подвижность HbA1, HbA2, HbF и HbP в агарозе и ПААГ оказывают додецилсульфат натрия, тритон, мочевина и бихромат калия. На ранних этапах выделения HbP следует использовать модифицированную методику щелочной денатурации с 40-секундной экспозицией в 1,2 н NaOH.
- Оптимальными для количественного определения основных типов гемоглобина являются методы иммунохимического анализа. Разработаны точные алгоритмы селективного количественного анализа HbA1, HbA2, HbF и HbP, основанные на методах двойной иммунодиффузии, ракетного иммуноэлектрофореза и РИД по Манчини. Создана и внедрена в клиническую практику комплексная схема количественной оценки гемоглобинового спектра по основным типам гемоглобина, основанной на модифицированных иммунохимических методах.
- Иммунохимическим путем проведен количественный анализ динамики концентраций HbР и HbF в раннем эмбриогенезе (с 4 по 12 нед гестации), и уточнены сроки начала продукции антенатальных гемоглобинов.
- Доказано значение HbP и HbF как канцероэмбриональных антигенов в диагностике миелопролиферативных заболеваний, оценке степени тяжести и прогноза гипоксии новорожденных, ЗВУР и глубокой недоношенности. Впервые отмечено значение иммунохимического теста на HbF в оценке тяжести и эффективности лечения больных опийной наркоманией и алкогольной зависимостью.
2.Агапова А.Б., Дьякова О.Н., Кривенцев Ю.А. Разработка диагностической иммунодиффузионной тест-системы на фетальный гемоглобин // Материалы конференции молодых ученых с международным участием “Белки-маркеры патологических состояний”. – Астрахань-Москва. – 2001. – С.101-102.
3.Агапова А.Б., Кривенцев Ю.А. Получение чистого антигена и моделирование тест-системы на фетальный гемоглобин // Материалы 82-й итоговой студенческой научной конференции АГМА. Астрахань. - 2001. – С.13.
4.Никулина Д.М., Дьякова О.Н., Кривенцев Ю.А., Корноухова И.Ю., Агапова А.Б. Фетальный гемоглобин как тест для диагностики гипоксических состояний // Материалы III съезда биохимического общества РАН. – С-Пб. 2002. – С.131.
5.Никулина Д.М., Сентюрова Л.Г., Кривенцев Ю.А., Агапова А.Б., Дьякова О.Н. Отчет о научно-исследовательской работе разработка иммунохимических тест-систем для выявления и оценки гипоксических состояний и деструкции тканей в организме человека // Отчет включен в национальный фонд РФ. Инвентарный № 02.2.00403489.
6.Метелкина Е.В., Коханов А.В., Агапова А.Б., Кривенцев Ю.А., Суринков Д.Б. Железосодержащие белки в остром периоде черепно-мозговой и скелетной травмы // Материалы научно-практической конференции и школы-семинара для молодых учёных с международным участием «Современные достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины». - Астрахань-Москва. – 2004. – с.114-118.
7.Бисалиева Р.А., Кривенцев Ю.А., Никулина Д.М., Краморенко П.В. Разработка способа выделения эмбрионального гемоглобина и моделирование иммунохимической тест-системы на него / Материалы научно-практической конференции с международным участием «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины». – Астрахань-Волгоград-Москва. – 2006. – С.34-37.
8.Кривенцев Ю.А., Бисалиева Р.А., Ковалева Н.А., Лада Л.В. Получение специфической антисыворотки на фетальный гемоглобин / Материалы научно-практической конференции с международным участием «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины». – Астрахань-Волгоград-Москва. – 2006. – С.62-65.
9.Коханов А.В., Метелкина Е.В., Кривенцев Ю.А., Белопасов В.В. Суточные ритмы показателей системы эритрона у больных с тяжелой черепно-мозговой травмой / Труды Астраханской государственной медицинской академии. – Астрахань. – 2006. - Т.33. – С.264-267.
10.Кривенцев Ю.А., Бисалиева Р.А., Никулина Д.М., Краморенко П.В., Семенова Т.Б. Иммунохимический анализ продукции эмбрионального гемоглобина в раннем эмбриогенезе человека / Материалы научно-практической конференции с международным участием «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины». – Астрахань-Волгоград-Москва. – 2006. – С.58-62.
11.Кривенцев Ю.А., Никулина Д.М., Бисалиева Р.А., Пичугина Н.А. Разработка способа количественного определения фетального гемоглобина человека / Материалы научно-практической конференции с международным участием «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины». – Астрахань-Волгоград-Москва. – 2006. – С.65-68.
12.Никулина Д.М., Кривенцев Ю.А., Бахмутова Л.А., Бисалиева Р.А., Штепо М.В., Лапеко С.В. Определение эмбрионального гемоглобина в крови новорожденных с внутриутробной гипоксией / Материалы научно-практической конференции с международным участием «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины». – Астрахань-Волгоград-Москва. – 2006. – С.72-73.
13.Коханов А.В., Метелкина Е.В., Кривенцев Ю.А., Белопасов В.В. Суточные ритмы показателей системы эритрона у больных с тяжелой черепно-мозговой травмой // Труды Астраханской государственной медицинской академии. – Астрахань. – 2006. - Т.33. – С.264-267.
14.Кривенцев Ю.А., Бисалиева Р.А., Носков И.А. Изучение воздействия детергентов на эмбриональный гемоглобин // Вестник Астраханского государственного технического университета. - Астрахань. – 2006. - №6. - Т.35. – С.69-72.
15.Бахмутова Л.А., Кривенцев Ю.А., Огуль Л.А. Выявление эмбрионального гемоглобина в крови новорожденных с внутриутробной гипоксией // Вопросы практической педиатрии. – М. – 2006. – Т.1. - №4. – С.12.
16.Кривенцев Ю.А., Никулина Д.М., Бисалиева Р.А., Борисова Н.Б., Бисалиев Р.В. Экспрессия ε-гена эмбрионального гемоглобина при гематологической патологии // Успехи современного естествознания. – М. – 2007. - №3. – С.72-75.
17.Кривенцев Ю.А., Никулина Д.М., Бисалиева Р.А. Иммунохимический анализ концентрации фетального гемоглобина в крови новорожденных мальчиков и девочек с внутриутробной гипоксией // Омский научный вестник. – Омск. – 2006. - №9. – Т.46. – С.272-274.
18.Кривенцев Ю.А., Никулина Д.М., Бисалиева Р.А., Борисока Н.В. Иммунохимический анализ содержания эмбрионального гемоглобина в крови больных с онкогематологической патологией // Омский научный вестник. – Омск. – 2006. - №8. – Т.44. – С.279-281.
19.Кривенцев Ю.А., Бисалиева Р.А., Никулина Д.М., Носков А.И. Моделирование нового способа количественного анализа плодового гемоглобина человека // Фундаментальные исследования. М. 2007. №4. С.76-78.
20.Кривенцев Ю.А., Бисалиева Р.А., Семенова Т.Б., Никулина Д.М., Краморенко П.В. Изучение относительной электрофоретической подвижности анте- и постнатальных типов гемоглобина человека / Астраханский медицинский журнал. – Астрахань. – 2007. - №2. – С.102.
21.Никулина Д.М., Кривенцев Ю.А., Бахмутова Л.А., Бисалиева Р.А., Лапеко С.В., Штепо М.В., Огуль Л.А. Фетальный и эмбриональный типы гемоглобина в крови новорожденных с внутриутробной гипоксией / Астраханский медицинский журнал. – Астрахань. – 2007. - №2. – С.132-133.
22.Бисалиева Р.А., Кривенцев Ю.А., Яблокова И.Ю., Ким И.В., Вафина Р.А. Изучение подходов к выделению и очистке эмбрионального гемоглобина / Материалы конференции молодых ученых АГМА. – 2007. – С.30-31.
23.Кико Е.Е., Бисалиева Р.А., Кривенцев Ю.А., Ким И.В., Яблокова И.Ю., Вафина Р.А. Иммунохимическое определение эмбрионального гемоглобина у больных гемобластозами / Материалы VI Всероссийской конференции молодых ученых «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной онкологии». – М. – 2007. – С.107-109.
24.Кривенцев Ю.А., Никулина Д.М., Бисалиева Р.А. Гемоглобины человека // Вестник Астраханского государственного технического университета. - Астрахань. – 2007. - №6. - Т.41. – С.34-41.
25.Кривенцев Ю.А., Никулина Д.М. Строение и биологическая роль белков гемоглобинового профиля / Гриф УМО 897 от 10.12.2007. Изд-во АГМА, Астрахань, 2007. 101 с.
26.Кривенцев Ю.А., Никулина Д.М., Бисалиева Р.А. Способ количественного определения фетального гемоглобина человека // Бюллетень «Изобретения. Полезные модели». - М. - 10.11.2007. - №31 (III ч.), С.666.
27.Никулина Д.М., Воробьева Т.Б., Кривенцев Ю.А. Стадиоспецифические белки как маркеры развития плода и состояния новорожденного // Материалы IV съезда Российского общества биохимиков и молекулярных биологов. – Новосибирск. – 2008. – С.474.
28.Бисалиева Р.А., Кривенцев Ю.А., Краморенко П.В. Иммунохимический анализ продукции фетального гемоглобина в раннем эмбриогенезе человека // Материалы конференции молодых ученых ГОУ ВПО «АГМА Росздрава». – Астрахань. – 2008. – С.4-6.
29.Бисалиева Р.А., Кривенцев Ю.А., Никулина Д.М., Краморенко П.В., Дьячкова Т.Б. Иммунохимический анализ продукции антенатальных гемоглобинов в раннем эмбриогенезе человека // Российский иммунологический журнал (РАН). – М. «Наука». 2008. – Т.2(11), № 2-3. С. 327.
30.Кривенцев Ю.А., Никулина Д.М., Бисалиева Р.А. Моделирование нового способа определения плодового гемоглобина человека // Астраханский медицинский журнал. – Астрахань. – 2008. – Т.3. - №2. – С.53-55.
31.Кривенцев Ю.А., Бисалиева Р.А., Батуев Д.Г., Яблокова И.Ю., Вафина Р.А.., Мустафаев И.М.-А. Пополнение сведений по физико-химическим свойствам гемоглобина типов: A1, A2, F и P // Материалы 6-й международной научно-практической конференции «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины». –Астраханский медицинский журнал. Астрахань-Москва. 2008. Т.3. №3. С.20-22.
32.Кривенцев Ю.А., Никулина Д.М., Заклякова Л.В., Бисалиева Р.А., Борисова Н.В., Кико Е.Е., Ким И.В. Иммунохимический тест на антенатальные гемоглобины в гематологии // Материалы 6-й международной научно-практической конференции «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины». – Астраханский медицинский журнал. – Астрахань-Москва. – 2008. – Т.3. - №3. – С.106-110.
33.Коханов А.В., Никулина Д.М., Кривенцев Ю.А., Белопасов В.В., Метелкина Е.В. Фетальный гемоглобин как маркер гипоксии при черепно-мозговой травме // Материалы 6-й международной научно-практической конференции «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины». – Астраханский медицинский журнал. – Астрахань-Москва. – 2008. – Т.3. - №3. – С.171-173.
34.Никулина Д.М., Кривенцев Ю.А., Бисалиева Р.А. Иммунохимический тест на примитивный гемоглобин: перспективы внедрения.// Материалы 6-й международной научно-практической конференции «Достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины». – Астраханский медицинский журнал. – Астрахань-Москва. – 2008. – Т.3. - №3. – С.185-188.
35.Бисалиева Р.А., Кривенцев Ю.А., Бисалиев Р.В., Кальной В.С. Иммунохимический анализ фетального гемоглобина в крови наркологических больных // Наркология. – М. – 2009. - №1(85). – С.95-97.
36.Кривенцев Ю.А., Бисалиева Р.А., Никулина Д.М. Модификация способа количественного анализа эмбрионального гемоглобина человека // Материалы межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные проблемы кардиологии детей и взрослых-2009». – Астрахань. 2009. С.138-140.
37.Бисалиева Р.А., Штепо М.В., Кривенцев Ю.А., Никулина Д.М. Железосодержащие белки в крови новорожденных с внутриутробной гипоксией // Материалы международна наукова конференцiя студентiв та молодих вчених «Молодь медицинi майбутнього». – Одесса. – 2009. – С.71.
38.Кривенцев Ю.А., Бисалиева Р.А., Никулина Д.М., Носков А.И. Разработка оптимального алгоритма для создания иммунохимической тест-системы на примитивный гемоглобин человека // Вестник российской военно-медицинской академии. - С.-Пб. – 2009. - №1(25). – С.450.
39.Никулина Д.М., Кривенцев Ю.А., Бахмутова Л.А., Бисалиева Р.А., Лапеко С.В. Эмбриональный гемоглобин как критерий оценки гипоксии новорожденных // Вестник российской военно-медицинской академии. - С.-Пб. – 2009. - №1(25). – С.450-451.
40.Бахмутова Л.А., Кривенцев Ю.А., Никулина Д.М., Лапеко С.В., Бисалиева Р.А. Антенатальные гемоглобины в оценке течения раннего неонатального периода у новорожденных с задержкой внутриутробного развития // Вестник российской военно-медицинской академии. - С.-Пб. – 2009. - №1(25). – С.451.
41.Бахмутова Л.А., Никулина Д.М., Кривенцев Ю.А. Клиническое значение изучения антенатальных типов гемоглобина для прогноза ранней адаптации у недоношенных новорожденных детей // Вопросы современной педиатрии. – 2009. – Т.8. - №2. – С.120-122.
Патент на изобретение
Кривенцев Ю.А., Никулина Д.М., Бисалиева Р.А. Способ количественного определения фетального гемоглобина человека // Патент на изобретение №2310204. Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений РФ 10.11.2007. г. Москва. – 7 с.