- В настоящей работе впервые показано, что при непермиссивной температуре (33оС) в клетках растений табака Nicotiana tabacum, зараженных ts-мутантом TMV Ni2519, синтезируется вирионная РНК и функционально активный структурный белок. В результате реконструкции in vitro при 33о образуются дефектные вирусные частицы (ДВЧ), чувствительные к РНКазе (РНК нормальных вирионов TMV защищена от действия рибонуклеаз). Определено положение чувствительного к действию РНКаз сайта в составе ДВЧ. Показано, что причиной образования ДВЧ является множественная инициация сборки вирионов. Таким образом, можно предполагать, что ts-фенотип сборки этого мутанта обусловлен температурочувствительностью самой молекулы РНК, проявляющейся в одновременном функционировании двух участков инициации реконструкции при непермиссиовной температуре.
- В ходе исследований установлено, что функция транспорта (распространение из клетки в клетку) мутантов Ni2519 и LS1 при непермиссиовной температуре может быть комплементирована вирусом-помощником. С другой стороны, комплементировать функцию сборки зрелых вирусных частиц у Ni2519 вирусом-помощником не удалось.
- Показано также, что комплементация транспорта может осуществляться не только родственным штаммом тобамовируса, но и таксономически весьма отдаленными вирусами растений, а также гетерологичными траснпортными белками в трансгенных растениях. Показано, что нефункциональный ТБ, экспрессирующийся в трансгенных растениях, способен подавлять накопление близкородственного вируса, а полноценный ТБ может негативно сказываться на накоплении неродственных вирусов.
- Продемонстрирована роль ТБ CMV в процессе транспорта вируса в ряде растений-хозяев, а также способность трансгенных по ТБ растений комплементировать не только различных мутантов CMV с дефектными ТБ , но и ряд других вирусов. В ходе детального изучения процесса формирования делеций в гене ТБ в составе дефектных РНК3 CMV в трансгенных растениях было обнаружено, что все конечные стабильные формы РНК3 мутантов имели исходную рамку считывания гена ТБ вне зависимости от характера первоначальной делеции.
- Впервые продемонстрировано, что для межклеточного распространения CMV необходим лишь белок оболочки (СР) - но не сформированные вирионы.
- С использованием мутантов по структурному белку PLRV определены аминокислотные последовательности, ответственные за сборку полноценных вирионов, 4 за распространение инфекции в ряде растений-хозяев и за способность этого вируса передаваться от растения к растению вектором-насекомым (тлями).
1. Морозов С.Ю., Каплан И.Б., Тальянский М.Э., Атабеков И.Г. Синтез вирусспецифических РНК и белка оболочки в листьях растений, зараженных мутантом вируса табачной мозаики Ni2519 // Биологические Науки.– 1979.– № 11.– С. 34-40.
2. Каплан И.Б., Пшенникова Е.С., Козлов Ю.В., Аграновский А.А., Тальянский М.Э., Атабеков И.Г. Локализация участков инициации реконструкции в молекуле РНК мутанта вируса табачной мозаики Ni2519 // Молекулярная Биология.– 1982.– Т. 16.– №1.– С. 160-169.
3. Taliansky, M.E., Atabekova, T.I., Kaplan, I.B., Morozov, S.Yu., Malyshenko, S.I., Atabekov, J.G. A study of TMV ts-mutant Ni2519. I. Complementation experiments // Virology.– 1982.– V.118.– P. 301-308.
4. Taliansky, M.E., Kaplan, I.B., Jarvekulg, L.V., Atabekova, T.I., Agranovsky, A.A., Atabekov, J.G. A study of TMV ts-mutant Ni2519. II. Temperature- sensitive behavior of Ni2519 RNA upon reassembly // Virology.– 1982.– V. 118.– P. 309-316.
5. Kaplan, I.B., Kozlov, Yu.V., Pshennikova, E.S., Taliansky, M.E., Atabekov, J.G. A study of TMV ts-mutant Ni2519. III. Location of the reconstitution initiation sites on Ni2519 RNA // Virology. – 1982.– V. 118.– P. 317-323.
6. Taliansky, M.E., Malyshenko, S.I., Pshennikova, E.S., Kaplan, I.B., Ulanova, E.F., Atabekov, J.G. Plant-specific transport function. I. Virus genetic control required for systemic spread // Virology.– 1982.– V. 122.– P. 318-326.
7. Атабеков И.Г., Тальянский М.Э., Дрампян А.Х., Каплан И.Б., Турка И.Э. 1984. Системное распространение флоэмно-ограниченного вируса в клетках паренхимы в условиях смешанной инфекции // Биологические Науки.– 1984 –№ 10.– С. 28-31.
8. Taliansky, M.E, Malyshenko,S.I., Kaplan, I.B., Kondakova, O.A., Atabekov, J.G. Production of the tobacco mosaic virus (TMV) transport protein in transgenic plants is essential but insufficient for complementing foreign virus transport: a need for the full-length TMV genome or some other TMV-encoded product // Journal of General Virology.– 1992.– V.73.– P. 471-474.
9. Malyshenko, S.I., Kondakova, O.A., Nazarova, Ju.N., Kaplan, I.B., Taliansky, M.E., Atabekov, J.G. Reduction of tobacco mosaic virus accumulation in transgenic plants producing non-functional transport proteins // Journal of General Virology.– 1993.– V. 74.– P. 1149-1156. 40
10. Kaplan, I.B., Zhang, L., Shintaku, M.H., Li, Q., Marsh, L.M., Palukaitis, P. Complementation of virus movement defective mutants in transgenic tobacco expressing the cucumber mosaic virus movement protein // Phytopathology.– 1993.– V. 83.– P. 1349.
11. Gal-On, A., Kaplan, I.B., Roossinck, M.J., Palukaitis, P. The kinetics of infection of zucchini squash by cucumber mosaic virus indicate a function for RNA-1 in virus movement // Virology.– 1994.– V. 205.– P. 280-289.
12. Gal-On, A., Kaplan, I.B., Palukaitis, P. Differential effects of satellite RNA on the accumulation of cucumber mosaic virus RNAs and their encoded proteins in tobacco vs zucchini squash with two strains of CMV helper virus // Virology.– 1995.– V. 208.– P. 58-66.
13. Kaplan, I.B., Shintaku, M.H., Li, Q., Zhang, L., Marsh, L.M., Palukaitis, P. Complementation of virus movement in transgenic tobacco expressing the cucumber mosaic virus 3a gene // Virology.– 1995.– V. 209.– P. 188-199.
14. Gal-On, A., Kaplan, I.B., Palukaitis, P. Characterization of cucumber mosaic virus. II. Identification of cucumber mosaic virus movement protein sequences that influence accumulation and systemic infection in tobacco // Virology.– 1996.– V. 226.– P. 354-361.
15. Kaplan, I.B., Gal-On, A., Palukaitis, P. Characterization of cucumber mosaic virus. III. Localization of sequences in the movement protein controlling systemic infection in cucurbits // Virology.– 1997.– V. 230.– P. 343-349.
16. Kaplan, I.B., Zhang, L., Palukaitis, P. Characterization of cucumber mosaic virus. V. Cell-to-cell movement requires capsid protein but not virions // Virology.– 1998.– V. 246.– P. 221-231.
17. Kaplan, I.B., Palukaitis, P. Characterization of cucumber mosaic virus. VI. Generation of deletions in defective RNA 3s during passage in transgenic tobacco expressing the 3a gene // Virology.– 1998.– V. 251.– P. 279-287.
18. Kaplan, I.B., Lee, K-C., Canto, T., Wong, S-M., Palukaitis, P. Host-specific encapsidation of a defective RNA 3 of cucumber mosaic virus // Journal of General Virology.– 2004.– V. 85.– P.3757-3763.
19. Liang, D., Gray, S.M., Kaplan, I., Palukaitis, P. Site-directed mutagenesis and generation of chimeric viruses by homologous recombination in yeast to facilitate analysis of plant-virus interactions // Molecular Plant-Microbe Interactions (MPMI).– 2004.– V. 17.– No 6.– P. 571-576.
20. Lee, L., Kaplan, I.B., Ripoll, D.R., Liang, D., Palukaitis, P., Gray, S.M. A surface loop of the potato leafroll virus coat protein is involved in virion assembly, systemic movement, and aphid transmission // Journal of Virology.– 2005.– V. 6.– P. 571-576. 41
21. Kaplan, I.B., Lee, L., Ripoll, D.R., Palukaitis, P., Gildow, F.E., Gray, S.M. Point mutations in the potato leafroll virus major capsid protein alter virion stability and aphid transmission // Journal of General Virology.– 2007.– V.88.– p.1821-1830.
Статьи в книгах и сборниках
22. Тальянский М.Э., Каплан И.Б., Морозов С.Ю. Некоторые особенности поведения температурочувствительного мутанта ВТМ Ni2519 в зараженных растениях // Вирусные болезни растений и меры борьбы с ними: сб.ст., Владивосток, 1980.– С. 62-65.
23. Каплан И.Б., Пшенникова Е.С., Тальянский М.Э. Специфичность РНК-белкогого взаимодействия при сборке некоторых штаммов ВТМ // Штаммы вирусов растений и их практическое применение: сб.ст., Елгава, 1981.– С.72-75.
24. Gal-On, A., Kaplan, I. and Palukaitis, P. In vitro and in vivo synthesis of cucumber mosaic virus // Phytopathology .– 1993.– V.83.– p.1350.
25. Kaplan, I.B. and Palukaitis, P. Characterization of defective forms of cucumber mosaic virus RNA 3 generated in CMV 3a-transgenic plants // Phytopathology.– 1995.– V.85.– p. 1152.
26. Kaplan, I.B., Wong, S-M. and Palukaitis, P. (1999). Characterization of a new naturally-occurring defective RNA 3 of cucumber mosaic virus // Phytopathology.– 1999.– V.89(6).– S38.
27. Lee, L., Kaplan, I., Ripoll, D., Liang, D., Palukaitis, P. and Gray, S. (2004). A surface loop of the potato leafroll virus coat protein is involved in virion stability and aphid transmission // Phytopathology. – 2004.– V.94.– S58.
Избранные тезисы
28. Taliansky, M.E., Malyshenko, S.I., Kaplan, I.B., Kondakova, O.A., Atabekov, J.G. The plant virus genome structure and expression // Abstracts of the FEBS Advanced Course, April 29-May 5, 1991. –Riga, USSR.– P. 10.
29. Zhang, L., Kaplan, I.B., Palukaitis, P. Effects of cucumber mosaic virus coat protein deletions on RNA binding and assembly // Abstracts of the IX International Congress of Virology, August 8-13, 1993.– Glasgow, Scotland. – P. 62.
30. Kaplan, I.B., Palukaitis, P. Transgenic tobacco plants expressing the cucumber mosaic virus 3a gene complement the movement of 3a-deficient viral mutants // Abstracts of the IX International Congress of Virology, August 8-13, 1993.– Glasgow, Scotland. – P. 336.
31. Kaplan, I.B., Zhang, L., Shintaku, M.H., Marsh, L.E. and Palukaitis. Replication of movement-deficient cucumber mosaic virus mutants in transgenic tobacco // Proceedings of the American Society for Virology, 1994. –July 9-13, Madison, WI. – P. 146.
32. Taliansky M.E., Malyshenko S.I., Kondakova O.A., Nazarova Yu.V., Kaplan I.B., Nazarova J.N. and Atabekov J.G. Induction of antiviral resistance in plants by transformation with viral movement protein gene sequences // Proceedings of 10th Anniversary Symposium of the Otto Warburg Center for Agricultural Biotechnology “Molecular Biology in Plant Breeding: Theoretical, Practical and Legal Aspects”, 1994. – Rehovot, Israel. – P.31.
33. Kaplan, I.B., Gal-On, A. and Palukaitis, P. Movement protein sequences of cucumber mosaic virus that control systemic infection in squash // Abstracts of the American Society for Virology, 15th Annual Meeting, 1996. – London, Ontario, Canada. – P.91.
34. Zhang, L., Kaplan, I.B. and Palukaitis P. Effect of capsid protein deletions on movement RNA binding and assembly of cucumber mosaic virus // Abstracts of the American Society for Virology, 15th Annual Meeting, 1996. –London, Ontario, Canada. – P.160.
35. Kaplan, I.B., Gal-On, A., Palukaitis, P. Cucumber mosaic virus 3a gene sequencescontrolling systemic infection in squash // Abstracts of the X International Congress of Virology, August 11-16, 1996. – Jerusalem, Israel. – P. 157.
36. Kaplan, I.B. and Palukaitis, P. Characterization of cucumber mosaic virus defective RNA3 variants generated in tobacco transgenic for the 3a gene // Abstracts of the X International Congress of Virology, August 11-16, 1996. – Jerusalem, Israel. – P. 157.
37. Zhang, L., Kaplan, I.B. and Palukaitis, P. Effects of cucumber mosaic virus capsid protein deletions on RNA binding and assembly // Abstracts of the X International Congress of Virology, August 11-16, 1996. – Jerusalem, Israel. – P. 62.