- Данная работа посвящена идентификации сигнальных молекул в хемосенсорных клетках путем экспрессионного анализа и исследования белок-белковых взаимодействий. Впервые показано, что во вкусовых клетках функционируют множественные метаботропные пуринорецепторы, включая P2Y1, P2Y2, P2Y4 и P2Y6. Впервые во вкусовых клетках типа II обнаружены транскрипты канальных белков коннексинов 26, 30.3, 31.1, 33, 36, 43 и паннексина 1. Впервые специфический маркер зрелых обонятельных нейронов OMP обнаружен во вкусовых клетках желобоватого вкусового сосочка языка.
- Установлены новые потенциальные партнеры по взаимодействию с пероксиредоксином 6 в обонятельном эпителии крысы. Все они оказались редокс-чувствительными белками. Относительно функционального характера многочисленности белок-белковых взаимодействий пероксиредоксина 6 была высказана гипотеза, которая разрешает существующую неопределенность относительно природы нативного восстанавливающего субстрата этого фермента. Впервые в обонятельном эпителии крысы обнаружен пероксиредоксин 1. Впервые проведен анализ ко-локализации транскриптов всех шести генов семейства пероксиредоксинов на уровне одиночной клетки.
- Разработана методология исследования профиля экспрессии генов в одиночных хемосенсорных клетках, основанная на глобальной амплификации мРНК. Сформирована стратегия экспрессионного анализа генов, имеющих процессированные псевдогены или не содержащих интроны, на уровне одиночной клетки. Впервые обнаружены многочисленные вариации в репертуаре транскриптов генов сигнальных белков в хемосенсорных клетках. Показано, что результаты, полученные на клеточной популяции и на одиночных клетках, требуют различной интерпретации. В частности, получены доказательства, что усредненные измерения, сделанные на группе клеток, могут не отражать поведения популяционного большинства.
- В работе решались вопросы, связанные с такой фундаментальной проблемой, как проявление флуктуаций в биологических системах. Исследование одиночных клеток позволило получить данные, подтверждающие концепцию стохастической экспрессии генов. Для объяснения обнаруженной гетерогенности популяции обонятельных нейронов выдвинуто предположение, что индивидуальные клетки имеют вероятностный фенотип.
1.Romanov R.A., Rogachevskaja O.A., Bystrova M.F., Kolesnikov S.S. Afferent output in mammalian taste cells. A role of electrical excitability in mediating transmitter release. В книге: Action Potential: Biophysical and Cellular Context, Initiation and Phases and Propagation. Ed. Columbus F. Nova Science Publishers, Inc., New York. 2010, p.133-157.
2.Быстрова М.Ф., Буданова Е.Н. Перекись водорода и пероксиредоксины в редокс-регуляции внутриклеточной сигнализации. Биологические мембраны. 2007, т.24, с.115-125.
3.Колесников С.С., Быстрова М.Ф. Термочувствительные ионные каналы. Биологические мембраны. 2006, т.23, с.119-128.
Статьи
4.Budanova E.N., Bystrova M.F. Peroxiredoxin-6-interacting proteins in rat olfactory epithelium. Биологические мембраны, 2011, т.28(4), с.254–261.
5.Романов Р.А., Быстрова М.Ф., Рогачевская О.А., Колесников С.С. Канальная активность рекомбинантного паннексина 1. Биологические мембраны, 2011, т.28 (5), 114-120.
6.Романов Р.А., Быстрова М.Ф., Рогачевская О.А., Колесников С.С. Идентификация ионных каналов TRPM5 во вкусовых клетках II типа. Нейрофизиология/Neurophysiology. 2011, т.43(3), с.
7.Bystrova M.F., Romanov R.A., Rogachevskaja O.A., Churbanov G.D., Kolesnikov S.S. Functional expression of the extracellular calcium-sensing receptor in mouse taste cells. Journal of Cell Sciences, 2010, v.123, p.972-982.
8.Рогачевская О.А., Кабанова Н.В., Быстрова М.Ф., Романов Р.А., Королькова Ю.В., Гришин Е.В., Колесников С.С. Исследование Р2Х2 и Р2Х3 рецепторов в гетерологической системе. Сборник статей «Рецепция и внутриклеточная сигнализация». Пущино. 2011, т.1, с.246-251.
9.Буданова Е.Н., Быстрова М.Ф. Выявление обонятельного маркерного белка в тканях с эктопической экспрессией генов обонятельных рецепторов. Биологические мембраны, 2010, т.27(1), с.138-142.
10.Романов Р.А., Яценко Ю.Е., Кабанова Н.В., Быстрова М.Ф., Колесников С.С. Потенциал-зависимые Са2+ каналы вкусовых клеток типа III. Биологические мембраны, 2009, т.26(4), с.258-264.
11.Буданова Е.Н., Быстрова М.Ф. Выявление обонятельного маркерного белка в тканях, экспрессирующих обонятельные рецепторы. Статья в сборнике «Рецепция и внутриклеточная сигнализация», Пущино, 2009, с.247-249.
12.Буданова Е.Н., Быстрова М.Ф. Поиск белок-белковых взаимодействий пероксиредоксина 6 с применением метода дрожжевой двухгибридной системы. Генетика, 2008, т. 44(2), с.170-176.
13.Романов Р.А., Рогачевская О.А., Быстрова М.Ф., Хохлов А.А., Колесников С.С. Механизм афферентной трансмиссии во вкусовых рецепторных клетках II типа. Статья в сборнике «Молекулярные, мембранные и клеточные основы функционирования биосистем». 2008, Минск. Издательский центр БГУ. с. 260-261.
14.Вystrova M.F., Budanova E.N., Fesenko E.E. An interaction between redox-sensitive proteins beta-actin and peroxiredoxin in rat olfactory epithelium. Статья в сборнике «Biological motility. Achievements and perspectives», 2008, v.2, р.210-212.
15.Romanov R.A., Rogachevskaja O.A., Bystrova M.F., Jiang P., Margolskee R.F., Kolesnikov S.S. Afferent neurotransmission mediated by hemichannels in mammalian taste cells. EMBO J. 2007, v.26, p.657-667
16.Bystrova M.F., Yatzenko Y.E., Fedorov I.V., Rogachevskaja O.A., Kolesnikov S.S. P2Y isoforms operative in mouse taste cells. Cell Tissue Research, 2006, v.323, p.377–382
17.Романов Р.А., Хохлов А.А., Быстрова М.Ф. Яценко Ю.Е., Рогачевская О.А., Колесников С.С. Мониторинг выброса АТР из одиночных клеток. Метод биосенсора. Биологические мембраны, 2007, т.24, 3с.16-321.
18.Быстрова М.Ф., Буданова Е.Н., Новоселов В.И., Фесенко Е.Е. Исследование четвертичной структуры пероксиредоксина 6. Биофизика, 2007, т.52(3), с.436-442
19.Романов Р.А., Рогачевская О.А., Быстрова М.Ф., Колесников С.С. Функциональный анализ вкусовых рецепторных клеток типа II. Статья в сборнике «Рецепция и внутриклеточная сигнализация». Пущино, 2007.
20.Novoselov S.V., Peshenko I.V., Popov V.V., Novoselov V.I., Bystrova M.F., Evdokimov V.A., Kamzalov S.S., Merkulova M.I., Shuvaeva T.M., Lipkin V.M., Fesenko E.E. Localization of the 28-kDa peroxiredoxin in rat epithelial tissues and its antioxidant properties. Cell and Tissue Research, 1999, v.298, p.471-480.
21.Merkulova M.I., Andreeva S.G., M.I., Shuvaeva T.M., Novoselov V.I., Peshenko I.V., Bystrova M.F., Novoselov S.V., Fesenko E.E., Lipkin V.M. A novel 45 kDa secretory protein from rat olfactory epithelium: primary structure and localization. FEBS Lett. 1999, v.450, p.126-130.
22.Новоселов В.И., Пешенко И.В., Новоселов С.В., Камзалов С.С., Быстрова М.Ф., Евдокимов В.А., Николаев Ю.В., Фесенко Е.Е. Протекторная активность 28 1-Cys пероксиредоксина определяется его пероксидазной активностью. Биофизика, 1999, т.44, с.568-570.
23.Новоселов В.И., Пешенко И.В., Евдокимов В.А., Камзалов С.С., Новоселов С.В., Быстрова М.Ф., Николаев Ю.В., Фесенко Е.Е. Свойства каталитического центра секреторного 28 кДа (1-Cys пероксиредоксина) из обонятельного эпителия крысы. Биофизика, 1998, т.43, с.610-616.
24.Николаев Ю.В., Евдокимов В.А., Попов В.И., Быстрова М.Ф. Надмолекулярная организация обонятельного рецепторного аппарата крысы: локализация рецепторных элементов и ГТФ-связывающий белков, ассоциированных с рецептором. Сенсорные системы, 1992, т.6(3), с.128-130.
25.Fesenko E.E., Novoselov V.I., Bystrova M.F. Properties of odorbinding glycoproteins from rat olfactory epithelium. Biochim. Biophys. Acta, 1988, v.937, p.369- 378.
26.Philippova T., Novoselov V., Bystrova M., Alexeev S. Microwave effect on camphor binding to rat olfactory epithelium. Bioelectromagnetics, 1988, v.9, p.347-354
27.Novoselov V.I., Bystrova M.F., Fesenko E.E. The subunits of odor-binding glycoproteins from rat olfactory epithelium. FEBS Lett. 1987 v.219, p.224- 226.
28.Новоселов В.И., Быстрова М.Ф., Фесенко Е.Е. Свойства рецепторных элементов из обонятельного эпителия крысы. Сенсорные системы, 1987, т.1(1), с. 7-13.