- На основе оптимизации состава питательных сред, источников эксплантов и условий культивирования разработана методика эффективной адвентивной регенерации побегов из соматических тканей декоративных, ягодных и плодовых культур, эффективность, которой, в частности для косточковых культур, значительно превосходит результаты, достигнутые другими исследователями.
- Разработаны схемы негативной селекции по степени устойчивости к антибиотикам (канамицин, гигромицин, генетицин) и позитивной селекции на маннозе в том числе впервые для косточковых культур на примере вишни и культурного сорта сливы. Проведен сравнительный анализ эффективности селекции трансформантов с различными селективными маркерными генами: nptII, hpt и pmi. Впервые при трансформации соматических тканей древесных были получены трансгенные растения с использованием метода позитивной селекции без генов устойчивости к антибиотикам.
- Показано положительное влияние присутствия растительного интрона PIV2 в конструкции гетерологичного гена на уровень и стабильность его экспрессии в вегетативных и генеративных тканях земляники, яблони и груши. Впервые показана возможность использования различных лидерных последовательностей клонированных из травянистых видов растений, кодирующих сигнальные пептиды, для эффективной клеточной компартментализации продуктов экспрессии гетерологичных генов в трансгенных растениях косточковых культур на примере сливы.
- Впервые получены трансгенные растения актинидии коломикты, трансформированные селективными генами nptII, hpt и, впервые, геном rolC A. rhizogenes. Изучены некоторые морфологические особенности rolС - трансформантов актинидии, впервые изучено содержание активных форм цитокининов (зеатина и зеатин-рибозида), ИУК и АБК в растениях актинидии коломикты, трансформированных геном rolC. Показано стабильное изменение гормонального статуса rolC-трансформантов актинидии по сравнению с нетрансформированными растениями. Показана потенциальная возможность изменения габитуса надземной части древесных растений посредством переноса в их геном гена rolC из A. rhizogenes.
- Показано изменение гормонального статуса ro/C-трансформантов хризантем сорта White Snowdon, предположительно являющегося причиной изменения: архитектуры растений; cтруктуры генеративных органов; морфологии пыльцевых зерен - ведущее к потере фертильности. Показана возможность использовать rolC гена в практическом цветоводстве для получения горшечных и декоративных форм у вегетативно размножающихся культур. При изучении изменений, вызванных экспрессией в растениях гена rolC из A.rhizogenes в хризантемах обнаружено присутствие гомологичных rolC гену последовательностей в геноме ряда сортов хризантем.
- Впервые получены трансгенные растения хризантемы, экспрессирующие укороченный ген 8-эндотоксина CrylAbl. Впервые достоверно установлена токсичность продуктов генов 8-эндотоксина для нового класса членистоногих - акарид при их экспрессии в трансгенном растении.
- Осуществлена трансформация клоновых подвоев яблони и груши геном обуславливающим устойчивость к гербицидам на основе фосфинотрицина и показана устойчивость полученных форм к высоким дозам коммерческих препаратов гербицидов в полевых условиях.
- Впервые получены трансгенные растения земляники садовой яблони и груши с геном thaumatinll. Показано положительное влияние экспрессии тауматина на устойчивость к фитопатогену Botrytis cinerea на примере земляники. Достигнуто улучшения вкуса плодов у нескольких линий земляники, яблони и груши с экспрессией тауматина. Впервые в России проведены полевые испытания ГМ растений земляники? яблони и груши. По результатам молекулярно-генетических анализов, биологического тестирования и полевых испытаний среди трансгенных клонов, содержащих ген thaumatin II, отобраны перспективные линии с улучшенным вкусом плодов и повышенной устойчивостью к Botrytis cinerea. Отобранные перспективные линии с геном thaumatin II обладают улучшенными агрономическими характеристиками.
- На основе использование феномена РНК интерференции и разработанных оригинальных методиках трансформации косточковых культур получены трансгенные линии культурного сорта сливы устойчивые к вирусу Шарки (PPV).
- Полученные формы трансгенных растений прошли испытания в полевых условиях и продемонстрировали достоверное изменение агрономических характеристик обусловленное экспрессией гетерологичных генов и могут далее внедряться в с/х производство или использоваться в качестве исходного материала в традиционных селекционных программах.
2.Dolgov S.V., Mitiouchkina T.Yu., Rukavtsova E.B., Buryanov Ya. (1995) Production of transgenic plants of Chrysanthemum morifolium Ramat. with the gene of Вас.thuringiensis 5-endotoxin. Acta Horticulturae, 420: 46-47.
3.Firsov A.P., Dolgov S.V. (1997) Agrobacterial transformation of Actinidia kolomicta. Acta Horticulturae, 447: 323-327.
4.Mitiouchkina T.Yu., Dolgov S.V., Skryabin K.G. (1997) Agrobacterial transformation of Chrysanthemum. Acta Horticulturae, 447: 329-334.
5.Merkulov S.M., Bartish I.V., Dolgov S.V., Pasternak T.P., McHugen A. (1998) The genetic transformation of the pear Pyrus communis L. mediated by Agrobacterium tumefaciens. Russ. J. Genetics, 34(3): 289-293.
6.Dolgov S.V., Shushkova T.V., Firsov A.P. (1998) Pineapple regeneration from leaf explants. Acta Horticulturae, 461: 439-444.
7.МирошниченкоД.Н., Долгов СВ. (1999) Влияние типа экспланта на эффективность агробактериальной трансформации гвоздики ремонтантной (Dianthus caryophyllus L.) при селекции на гигромицине Б. Генетика, 35(9): 1208-1213.
8.Dolgov S.V., Firsov A.P. (1999) Regeneration and agrobacterial transformation of sour cherry leaf disks. Acta Horticulture, 484: 577-580.
9.Firsov A.P., Dolgov S.V. (1999) Agrobacterial transformation and transfer of the antifreeze protein gene of winter flounder to the strawberry. Acta Horticulture, 484: 581-586.
10.Dolgov S.V., Lebedev V.G., Anisimova S.S., Lavrova N., Serdobinskiy L.A., Tjukavin G.B., Shadenkov S.A., Lunin V.G. (1999) Phytopathogene resistance improvement of horticultural crops by plant-defensin gene introduction. In: Developments in plant breeding. "Genetics and Breeding for Crop Quality and Resistance". Ed. S. Mugnozza, E. Porceddu and M. Pagnotta. Kluwer Ac. Publ. Dordrecht, Boston, London, 6: 111-118.
11.Dolgov S.V., Lebedev V.G, Firsov A.P., Taran S.A., Tjukavin G.B. (1999) Expression of thaumatinll gene in horticultural crops. In: Developments in plant breeding. "Genetics and Breeding for Crop Quality and Resistance". Ed. S. Mugnozza, E. Porceddu and M. Pagnotta. Kluwer Ac. Publ. Dordrecht, Boston, London, 6: 165-172.
12.Dolgov S.V., (2000) Genetic transformation of sour cherry (Cerasus vulgaris Mill.). In: Biotechnology in agriculture and forestry. "Transgenic trees". Ed. Y.P.S. Bajaj, Springer, Berlin, Heidelberg, New York, 44: 28-39.
13.Dolgov S.V., Miroshnichenko D.N., Schestibratov K.A. (2000) Agrobacterial transformation of apple cultivar and rootstock. Acta Horticulturae, 538: 619-624.
14.Miroshnichenko D.N., Dolgov S.V. (2000) Production of transgenic hygromycin resistant carnation (Dianthus caryophyllus L.) plants after cocultivation with Agrobacterium thumefaciens. Acta Horticulturae, 508: 255-258.
15.Лебедев В.Г., Долгов С.В. (2000) Влияние селективного агента и растительного интрона на эффективность трансформации и экспрессию гетерологичных генов в растениях груши (Pyrus communis L.). Генетика, 36(6): 792-798.
16.Mitiouchkina T.Yu., Dolgov S.V. (2000) Modification of chrysanthemum plant and flower architecture by rolC gene from Agrobacterium rhizogenes introduction. Acta Horticulturae, 508:163-169.
17.Mitiouchkina T.Yu., Ivanova E.P., Taran S.A., Dolgov S.V. (2000) Chalcone synthase gene from Antirrhinum majus in antisense orientation successfully suppressed the petals pigmentaion of chrysanthemum. Acta Horticulturae, 508: 215-217.
18.Dolgov S.V., Lebedev V.G., Miroshnichenko D.N., Mitiouchkina T.Yu., Schestibratov K.A., Schmatchenko V. (2002) Molecular breeding of fruit crops. Bulletin of the state Nikitsky botanical garden, 85: 56-58.
19.Lebedev V.G., Dolgov S.V. (2002) Influence of various factors on adventitious shoot formation from pear leaf explants. Acta Horticulturae, 596: 469-472.
20.Lebedev V.G., Lavrova N., Lunin V.G., Naroditski B.S., Dolgov S.V. (2002) Plant-defensin genes introduction for improvement of pear phytopathogene resistance. Acta Horticulturae, 596: 167-172.
21.Lebedev V.G., Skryabin K.G., Dolgov S.V. (2002) Transgenic pear clonal rootstocks resistant to herbicide “Basta”. Acta Horticulturae, 596: 193-197.
22.Lebedev V.G., Taran S.A., Shmatchenko V.V., Dolgov S.V. (2002) Pear transformation with the gene for supersweet protein thaumatin II. Acta Horticulturae, 596: 199-202.
23.Lebedev V.G., Taran S.A., Shmatchenko V.V., Lunin V.G., Skryabin K.G., Dolgov S.V. (2002) Molecular breeding of pear. Acta Horticulturae, 587: 217-223.
24.Schestibratov K.A., Mikhailov R.V., Dolgov S.V. (2003) Plantlet regeneration from subculturable nodular callus of Pinus radiata. Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 72: 139-146.
25.Филиппов М.В., Мирошниченко Д.Н., Славохотова А.А., Долгов С.В. (2004) Разработка системы трансформации и получение форм пшеницы (Triticum aestivum L.) устойчивых к гербициду. Достижения науки и техники АПК, 1: 10-12.
26.Dolgov S.V., Schestibratov K.A. and Mikhailov R.V. (2004) Apple transformation with the gene of supersweet protein thaumatin II. Acta Horticulturae, 663: 507-510.
27.Dolgov S.V., Skryabin K.G., (2004) Transgenic apple clonal rootstock resistant to Basta herbicide. Acta Horticulturae, 663: 499-502.
28.Korneeva I., Firsov A., Lebedev V., Schestibratov K., Pushin A., Shulga O., Dolgov S. (2005) Expression and subcellular localization of a PR-5 protein with different signal sequences in transgenic tomato and tobacco plants. Revue de Cytologie et Biologie Vйgйtales-Le Botaniste, 28: 260-267.
29.Schestibratov K.A., Dolgov S.V. (2005) Transgenic strawberry plants expressing a thaumatin II gene demonstrate enhanced resistance to Botrytis cinerea. Scienta Horticulture, 106(2): 177-189.
30.Филиппов М.В., Мирошниченко Д.Н., Верниковская Д.И., Долгов С.В. (2006) Подбор оптимальных параметров баллистической трансформации генома мягкой пшеницы. Сельскохозяйственная биология, 1: 67-73.
31.Skachkova T., Mitiouchkina T., Taran S., Dolgov S. (2006) Molecular biology approach for improving chrysanthemum resistance to virus B. Acta Horticulturae, 714: 185-192.
32. Schestibratov K.A., Dolgov S.V. (2006) Genetic engineering of strawberry cv. Firework and cv. Selekta for taste improvement and enhanced disease resistance by introduction of thauII gene. Acta Horticulturae, 708: 475-482.
33.Filippov M., Miroshnichenko D., Vernikovskaya D., Dolgov S. (2006) The effect of auxins, time exposure to auxin and genotypes on somatic embryogenesis from mature embryos of wheat. Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 84(2): 192–201.
34.Mitiouchkina T.Yu., Zavriev S.K., Dolgov S.V. (2006) Molecular Biology approach for improving chrysanthemum resistance to virus B. Acta Horticulturae, 772: 327-332.
35.Dolgov S.V., Hanke M-V. Transgenic fruit tree rootstocks. (2006) In: Tree Transgenesis. Eds. M. Fladung, D. Ewald. Springer, Berlin, Heidelberg, New York, 335-350.
36.Mikhailov R.V., Dolgov S.V. (2007) Transgenic plum (Prunus domestica. L.) plants obtained by agrobacterium mediated transfiormation of leaf explants with various selective agents. Acta Horticulturae, 738: 613-623.
37.Mikhailov R.V., Muratova S.A., Dolgov S.V. (2007) Production of transgenic plum plants from vegetative tissues by means of positive selection. Acta Horticulturae, 734: 129-138.
38.Miroshnichenko D., Filippov M., Babakov A., Dolgov S. (2007) Genetic engineering of Russian wheat genotypes for abiotic stress resistance. Developments in Plant Breeding. “Wheat Production in Stressed Environments”. Eds. H.T.Burk, J.E.Nisi, N.Salomon. Springer, Dordrecht, The Netherlands, 12: 715-721.
39.Miroshnichenko D., Filippov M., Dolgov S. (2007) Genetic transformation of Russian wheat cultivars. Biotechnology&Biotechnology Equipment, 21(4): 399-402.
40.Чернобровкина М.А., Сидоров Е.А., Баранов И.А., Харченко П.Н., Долгов С.В. (2007) Влияние параметров биолистической трансформации ярового ячменя (Hordeum vulgare L.) на уровень транзиентной экспрессии репортерного гена GFP. Изв. РАН. Сер. Биол, 6: 669-675.
41.Popowich E. A., Firsov A. P., Mitiouchkina T. Y., Filipenya V. L., Dolgov S.V., Reshetnikov V. N. (2007) Agrobacterium mediated transformation of Hyacinthus orientalis with thaumatin II gene to control fungal diseases. Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 90(3): 237-244.
42.Song G.,.Lang G, Dolgov S., Sink K. (2008) "Cherry" in A Compendium of Transgenic Crop Plants: Temperate Fruits and Nuts. Eds. C.Kole and T.Hall, Blackwell Publishing. 5: 161-188.
43.Пушин А.С., Овчинникова Е.В.,.Шульга О.А,.Фирсов А.П, Долгов С.В. (2008) Аккумуляция рекомбинантного суперсладкого белка тауматина в апопласте трансгенных растений табака. Биотехнология, 6: 31-40.
44.Malnoy M., Chevreau E., Bell R., Dolgov S., Aldwinckle H. (2008) "Pears" in A Compendium of Transgenic Crop Plants: Temperate Fruits and Nuts. Eds. C.Kole and T.Hall, Blackwell Publishing. 5: 53-78.
45.Lebedev V.G., Dolgov S.V. (2008) Stability of gus and bar gene expression in transgenic pear clonal rootstock plants during several years. Acta Horticulturae, 800: 373-381.
46.Тимербаев В.Р., Шестибратов К.А., Долгов С.В. (2008) Клонирование и функциональный анализ трех форм промотора полигалактуроназы томата. Биотехнология, 6: 23-30.
47.Korneeva I.V., Shestibratov K.A., Lavrova N.V.,.Firsov A.P, Lebedev V.G., Kharchenko P.N., Dolgov S.V. (2008) Expression of PR-5 protein thaumatinII for improving disease resistance and fruit quality of tomato. Acta Horticulturae, 789: 151-158.
48.Михайлов Р.В., Долгов С.В. (2009) Разработка эффективной схемы селекции с использованием селективных маркерных генов для агробактериальной генетической трансформации листовых эксплантов сливы сорта Стартовая. Биотехнология, 1: 45-52.
49.Miroshnichenko D., Filippov M., Dolgov S. (2009) Effects of daminozide on somatic embryogenesis from immature and mature embryos of wheat. Australian Journal of Crop Science, 3(2): 83-94.
50.Shulga O.A., Mitiouchkina T.Yu., Shchennikova A.V., Skryabin K.G., Dolgov S.V. (2009) Early flowering transgenic chrysanthemum plants. Acta Horticulturae, 836: 241-246.
51. Тимербаев В.Р., Долгов С.В. (2009) Использование механизма РНК-интерференции для ингибирования экспрессии гена АЦК-оксидазы томата с целью увеличения лежкости плодов. Биотехнология, 1: 11-22.
52.Скрипников А.Ю., Поляков Н.Б., Толчева Е.В., Великодворская В.В, Долгов С.В.,. Демина И.А., Рогова М.А, Говорун В.М. (2009) Протеомный анализ мха Physcomitrella patens. Биохимия, 74(5): 593-606.
53.Сидоров Е.А., Чернобровкина М.А., Николаева А.Н., Харченко П.Н., Долгов С.В. (2009) Индуцированный морфогенез и регенерация in vitro растений ячменя отечественных сортов. С-х. биология. Сер. Биол. раст. 3: 73-78.
54.Халилуев М.Р., Харченко П.Н., Долгов С.В. (2010) Разработка системы регенерации и изучение трансформационного потенциала томата промышленного сорта. Доклады РАСХН, 3: 22-26.
55.Халилуев М.Р., Харченко П.Н., Долгов С.В. (2010) Генетическая трансформация томата генами защитных хитинсвязывающих белков и антимикробных пептидов. Известия ТСХА, 6: 75-83.
56.Мирошниченко Д.Н., Порошин Г.Н., Долгов С.В. (2010) Генетическая трансформация пшеницы с использованием тканей зрелых семян. Биотехнология, 6: 34-41.
57.Dolgov S.V., Mikhaylov R.V., Serova T.A., Shulga O.A., Firsov A.P. (2010) Pathogen-derived methods for improving resistance of transgenic plums (Prunus domestica L.) for Plum pox virus infection. Julius-Kuhn-Archiv, 427: 133-140.
58.Тимербаев В.Р., Шестибратов К.А., Лебедев В.Г., Корнеева И.В., Харченко П.Н., Долгов С.В. (2008) Использование механизма ПТИГ для модификации созревания плодов. Молчание генов. Ред. Данилкович А.В. Пущино. 253-269.
59.Долгов С.В, Мирошниченко Д.Н, Шалойко Л.А. (2005) Экстракт из растительных соматических зародышей, полученных в условиях искусственного культивирования in vitro, для бесклеточных систем трансляции и или сопряженной траскрипции-транcляции. Патент РФ № 2261278, 27 сентября 2005 г.
60.Шестибратов К.А., Долгов С.В. (2002) Способ получения трансгенных растений с повышенной устойчивостью к фитопатогенам. Патент РФ № 2002128414, приоритет от 24 октября 2002 г.
61.Shestibratov K.A. Dolgov S.V. Method for producing a transgenic plant with the aid of Agrobacterium tumefaciens. Australian AU 2003277759 B2. 21 января 2010 г.
62.Заявка на патент с положительным решением. Shestibratov K.A. Dolgov S.V. Method for producing a transgenic plant with the aid of Agrobacterium tumefaciens. US 2007/0124835 05.312007, от 31 мая 2007 г.