Научная тема: «КОНСТРУИРОВАНИЕ РЕКОМБИНАНТНЫХ АНТИГЕНОВ И ВЫЯВЛЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ГЕРПЕСВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ ЧЕЛОВЕКА»
Специальность: 03.00.06
Год: 2008
Отрасль науки: Биологические науки
Основные научные положения, сформулированные автором на основании проведенных исследований:

1. Сконструированные экспрессирующие плазмидные конструкции, включающие фрагменты генов герпесвирусов человека, обеспечивают биосинтез в клетках E. coli ре-комбинантных белков, содержащих иммунодоминантные области антигенов герпесвиру-сов 1-6 типов.

2. Использование рекомбинантных антигенов герпесвирусов 1-6 типов в ИФА позво-ляет выявлять антитела в сыворотке крови человека, специфичные для соответствующих герпесвирусов.

3. Сконструирован бактериальный (E. coli) экспрессирующий вектор на основе плазмид-ной ДНК pUR290-6*his. Отличительными особенностями этой конструкции является ко-дирование шестигистидинового тракта (6×His), который формирует на С-конце целевого рекомбинантного белка аффинную мишень для очистки полноразмерной копии белка на металлохелатных сорбентах, и биосинтез β-галактозидазы, которая в конечной конструк-ции укорачивается до небольшого размера и обеспечивает высокий уровень сорбции бел-ка на полистирольных планшетах.

4. Флуоресцентные антисыворотки к рекомбинантным белкам рек-рр150, рек-IE2 и рек-рр65 цитомегаловируса позволяют выявлять этот вирус в клинических образцах с по-мощью иммунофлуоресцентного анализа in situ.

5. Стандартная панель сывороток, содержащих и не содержащих антитела класса G к цитомегаловирусу человека (ОСО 42-28-360-01) позволяет контролировать качество им-муноферментных тест-систем, выявляющих специфические IgG к ЦМВ.

6. Олигонуклеотидные праймеры к генам US-6 (ВПГ-1) и UL44 (ВПГ-2), UL36 (ВВО), UL55 (ЦМВ), BKRF1 (ВЭБ) и U11 (ВГЧ-6), используемые в ПЦР, позволяют обнаруживать геномные ДНК различных штаммов и клинических изолятов соответствующих типов герпесвирусов.

Список опубликованных работ
1. М.А.Суслопаров, П.А.Белавин, А.В.Крендельщиков, А.И.Бедристов М.М.Бахтина, В.В.Гуторов, И.В.Бабкин, А.А.Чепурнов. “Клонирование и определение первичной структуры генов белков IE2 и pp150 цитомегаловируса человека (HCMV)//Молекулярная генетика, микробиология и вирусология, 1996, N1, стр. 32-35.

2. Суслопаров М. А., Суслопаров И. М., Плясунов И. В., Бахтина М. М., Сафронов П. Ф., Гришаев М. П., Блинов В. М., Иванькина Т. Ю. «Получение рекомбинантного антигена белка p52 цитомегаловируса человека (HCMV).» // Мол. генетика, микро-биология и вирусология, 2000, № 4, стр. 24-29.

3. Суслопаров И. М., Суслопаров М. А., Ивченко С. Н., Гришаев М. П., Смердова М. А., Косова Е.Ю., Блинов В. М., Сараев Д. В., Махова Н. М., Носкова Н. В. “Конст-руирование рекомбинантного антигена pp65 цитомегаловируса человека и иссле-дование его иммунохимических свойств» // Молекулярная генетика, микробиоло-гия и вирусология, 2005, № 2, стр. 28-32.

4. Ивченко С. Н., Суслопаров И. М., Масычева В. И., Суслопаров М. А., Мезенцев А.Н. “Конструирование жидкой панели сывороток, содержащих и не содержащих антитела класса IgG к цитомегаловирусу человека”. // Вестник Российской акаде-мии медицинских наук, 2004, №8, стр.37-39.

5. Ивченко С.Н., Суслопаров И.М., Масычева В.И., Суслопаров М.А., Лосев М.В. «Разработка иммуноферментной тест-системы для определения анти-тел в сыворотке крови к цитомегаловирусу человека».// Сибирский медицинский журнал, 2005, №2(том 20), стр. 53-55.

6. Леган М.В., Чернявский А.М., Мироненко С.П., Слайковская Л.Е., Литасова Е.Е., Лукьянчикова Н.Л., Кайдорин А.Г., Суслопаров М.А., Махова Н.М. «Выявление герпесвирусов в крови пациентов с кардиоваскулярной патологией». // Клиниче-ская лабораторная диагностика, №4, 2003, стр.48-49.

7. И. М. Суслопаров, М. А. Суслопаров, Н. М. Махова, Т. Ю. Загоруйко, Н. В. Носко-ва. «Выявление ДНК цитомегаловируса человека (Human cytomegalovirus) с помо-щью ПЦР» // Биотехнология, 2004, №6, С. 76-82.

8. Суслопаров И. М., Плясунов И. В., Сафронов П. Ф., Бахтина М. М., Махова Н. М., Локтева Л. А., Гришаев М. П., Суслопаров М. А. «Разработка и получение реком-бинантного антигена gD вируса простого герпеса 1-го типа (HSV-1).» / Мол. гене-тика, микробиология и вирусология, 2001, №2, стр. 34-37.

9. Суслопаров И. М., Суслопаров М. А., Жукова А. В., Махова Н. М., Носкова Н. В., Терещенко А. Ю., Смердова М. А., Гришаев М. П., Бечикова А. В. “Конструирова-ние рекомбинантного антигена gE вируса ветряной оспы и опоясывающего лишая и исследование его иммунохимических свойств”. // Биотехнология, 2004, №4, С. 83-89.

10. Суслопаров М. А., Суслопаров И. М., Плясунов И.B., Локтева Л. А., Бахтина М. М., Махова Н. М., Данилюк Н. К., Смердова М. А., Лобанова В. В., Гришаев М. П., Те-рещенко А. Ю.. “Конструирование рекомбинантных антигенов вируса Эпштейна-Барр и исследование их иммунохимических свойств”.// Биотехнология, 2004, №5, С. 87-94.

11. Плясунов И.B., Суслопаров М.А., Суслопаров И.М., Бахтина М.М., Махова Н.М., Гришаев М. П., Терещенко А.Н., Смердова М.А.. «Получение рекомбинантного ан-тигена р100 герпесвируса человека 6–го типа».// Биотехнология, 2004, №6, С. 83-88.

12. И.B. Плясунов, М.А. Суслопаров, М.М. Бахтина, И.М. Суслопаров, Н.М. Махова, Н.В. Носкова, О. Ю. Федоренко, А. В. Бечикова. “Использование метода полиме-разной цепной реакции для выявления ДНК вируса герпеса человека 6-го типа (Human herpes virus 6 type, HHV6)”// Биотехнология, 2005, №1, с. 83-89.

13. Суслопаров М.А., Махова Н.М., Носкова Н.В., Плясунов И.В., Суслопаров И.М., Сергеев А.Н., Шерстобоев Е.Ю., Мартюшев-Поклад А.В., Сергеева С.А., Эпштейн О.И., Глотов А.Г., Глотова Т.И. “Изучение эффективности лечебно-профилактического действия сверхмалых доз антител к гамма-интерферону на экс-периментальной мышиной модели герпесвирусной инфекции.”// Антибиотики и химиотерапия. – 2004. - № 10. – С. 3-6.

14. Суслопаров М. А., Суслопаров И. М., Махова Н. М., Омигов В. В., Литасова Е.Е., Леган М.В., Слайковская Л.Е., Мироненко С.П., Чернявский А.М., Лукьянчикова Н. Л. “Исследование маркеров герпесвирусных инфекций при ишемической болез-ни сердца (ИБС) ”// Молекулярная генетика, микробиология и вирусология, №4, 2005, стр.36-40..

15. М. А. Суслопаров, И. М. Суслопаров, Т. Ю. Загоруйко, Н. В. Носкова, Н. М. Махо-ва. “Выявление ДНК вирусов простого герпеса 1 и 2 типов (Herpes simplex virus 1, 2 type) с помощью ПЦР при генитальном герпесе”// Молекулярная генетика, микро-биология и вирусология, 2006, принята в печать.

16. Суслопаров М.А. " Рекомбинантная плазмидная ДНК pUL 32 HCMV, обеспечи-вающая экспрессию фрагмента гена UL32 цитомегаловируса человека, кодирую-щего гидрофильную часть основного матричного белка pp150, в клетках бактерий E. coli"//Патент РФ № 2151801 от 28.07.1998 г., БИ № 18 от 27.06.2000 г.

17. Суслопаров М.А., Суслопаров И.М., Плясунов И.В. "Фрагмент гена UL44 цитоме-галовируса человека, кодирующий иммунодоминантную часть белка р52, и реком-бинантная плазмидная ДНК pUL44 HCMV, обеспечивающая экспрессию фрагмен-та гена UL44 цитомегаловируса человека в клетках бактерий E. coli" // Патент РФ № 2151800 от 28.07.1998 г, БИ № 18 от 27.06.2000 г.

18. Суслопаров М.А., Суслопаров И.М., Плясунов И.В." Рекомбинантная плазмидная ДНК pHSVD1, обеспечивающая экспрессию фрагмента гена US6 вируса простого герпеса 1 типа человека, кодирующего иммунодоминантную часть гликопротеина Д этого вируса, в клетках бактерий E. coli"// Патент РФ № 2178806 от 21.01.2000 г, БИ №3 от 27.01. 2002 г.

19. Суслопаров М.А., Бахтина М.М., Суслопаров И.М., Махова Н.М., Плясунов И.В., Локтева Л.А." Рекомбинантная плазмидная ДНК pU11HHV6, обеспечивающая экс-прессию фрагмента гена U11 герпесвируса человека 6 типа, кодирующего иммуно-доминантную часть белка тегумента р100, в клетках бактерий E.coli" Патент РФ № 2189393 от 20.03.2000 г, БИ № 26 от 20.09.2002 г.

20. Суслопаров М.А., Плясунов И.В., Бахтина М.М., Суслопаров И.М., Махова Н.М." Рекомбинантная плазмидная ДНК pU27HHV6, обеспечивающая экспрессию фраг-мента гена U27 герпесвируса человека 6 типа, кодирующего имунодоминантную часть белка р41, в клетках бактерий E.coli" Патент РФ № 2201450 от 25.06.2001 г, БИ № 9 от 27.03.2003 г.

21. Суслопаров М.А., Суслопаров И.М." Рекомбинантная плазмидная ДНК pUL83HCMV, обеспечивающая экспрессию в клетках бактерий E.coli рекомби-нантного белка, содержащего иммунодоминантную часть фосфопротеина рр65 HCMV и фрагмент бета-галактозидазы"// Патент РФ № 2218408 от 05.11.2001 г, БИ № 34 от 10.12.2003 г.

22. Суслопаров М.А., Суслопаров И.М., Махова Н.М., Плясунов И.В., Бахтина М.М. " Синтетические олигонуклеотиды - праймеры, используемые для выявления ДНК цитомегаловируса человека"// Патент РФ № 2164945 от 07.12.1999 г, БИ № 10 от 10.04.2001 г.

23. Суслопаров М.А., Суслопаров И.М., Махова Н.М.. Плясунов И.В.. Бахтина М.М." Синтетические олигонуклеотиды-праймеры, используемые для выявления для вы-явления ДНК вируса простого герпеса 1 типа человека"// Патент РФ № 2165977 от 07.12.1999 г, БИ № 12 от 27.04.2001 г.

24. Суслопаров М.А., Суслопаров И.М., Загоруйко Т.Ю.. Махова Н.М." Синтетические олигонуклеотиды-праймеры, используемые для выявления ДНК вируса простого герпеса 2 типа человека"// Патент РФ № 2196179 от 07.03.2001 г, БИ № 1 от 10.01.2003 г.

25. Суслопаров М.А., Плясунов И.В., Бахтина М.М, Суслопаров И.М.. Махова Н.М." Пара синтетических олигонуклеотидов-праймеров, используемых для выявления ДНК вируса простого герпеса человека 6 типа"// Патент РФ № 2193067 от 05.07.2001 г, БИ № 32 от 20.11.2002 г.