Научная тема: «РОЛЬ И МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ ТРАНСКРИПЦИОННОГО ФАКТОРА OCT4 В ПОДДЕРЖАНИИ ПЛЮРИПОТЕНТНОСТИ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК МЛЕКОПИТАЮЩИХ»
Специальность: 03.00.25
Год: 2009
Отрасль науки: Биологические науки
Основные научные положения, сформулированные автором на основании проведенных исследований:

1. В отличие от трофобластной дифференцировки плюрипотетных клеток ранних зародышей мышей, их непосредственные потомки ППК при генетическом нокаутировании гена Oct4 подвергаются апоптотической гибели, что указывает на плейотропные функции в развитии клеток «полового пути».

2. Ген Oct4 не экспрессируется и не нужен для самообновления и дифференцировки взрослых соматических стволовых клеток, таких как нейрональные стволовые клетки, КСК и МСК костного мозга, а также стволовые клетки крипты эпителия кишечника, печени, и волосяного фолликула.

3. Существует новый класс cis-элементов в ДНК (MORE), опосредующих связывание гомо- и гетеродимеров Oct-факторов в ранее не описанной конфигурации, что было подтверждено после определения молекулярной структуры MORE и ранее описанного PORE типа POU димеров. Фосфорилирование серинов и треонинов, участвующих в белок-белковых взаимодействиях внутри PORE и MORE типов POU димеров, играет важную биологическую роль в селективной регуляции димеризации по двум описанным типам.

4. Димерный комплекс Oct1, образованный на PORE, способен рекрутировать изветный лимфоидный коактиватор OcaB и, тем самым, стимулировать транскрипцию, в то время как конфигурация POU димера, образованного на MORE ДНК, является непермиссивной для взаимодействия с OcaB. Природные МORE сайты, выявленные в промоторах генов тяжелых цепей иммуноглобулинов (VH) также непермисивны для OcaB.

5. OcaB может выступать в роли мощного стабилизатора димера Oct1 на PORE ДНК, а также в роли коактиватора, ослабляющего требования к специфичности в последовательности PORE. Полученные нами данные предполагают альтернативное соединение POUS и POUH суб-доменов в димерном Oct1/PORE комплексе в присутствии OcaB.

6. PIASy, один из известных членов семейства SUMO лигаз, является впервые описанным негативным транскрипционным ко-регулятором Oct4, способным взаимодействовать с POU доменом Oct4 через свой SAP домен и репрессировать (независимо от его SUMO-лигазной активности) Oct4-опосредованную транскрипционную активацию посредством релокализации Oct4 на периферию ядра.

7. Лентивирусы способны заражать ТЭ бластоцисты, однако, ввиду эпителиальной природы последней, не способны проникать через ТЭ и заражать клетки ВКМ. Данное свойство лентивирусов может быть использовано в функциональной генетике мыши для тканеспецифических генных манипуляций.

Список опубликованных работ
1. #Tomilin A., #Remenyi A., Lins K., Bak H., Leidel S., Vriend G., Wilmanns M., Scholer

H.R. 2000. Synergism with the coactivator OBF-1 (OCA-B, BOB-1) is mediated by a

specific POU dimer configuration. Cell. 103: 853-864.

2. #Remenyi A., #Tomilin A., Pohl E., Lins K., Philippsen A., Reinbold R., Schöler H.R.,

and Wilmanns M. 2001. Differential transcriptional activity of dimeric Oct-1 by DNAmotif

induced domain swapping. Mol. Cell. 8: 569-580.

3. Remenyi A., Tomilin A, Schöler HR, Wilmanns M. 2002. Differential activity by DNAinduced

quarternary structures of POU transcription factors. Biochem. Pharmacol. 64:

979-984.

4. Lins K., Reményi A., Tomilin A., Massa S., Wilmanns M., Matthias P. and Schöler H.R.

2003. OBF1 enhances transcriptional potential of Oct1. EMBO J. 22: 2188-2198.

5. Kehler J., Tolkunova E., Koschorz B., Pesce M., Gentile L., Boiani M., Lomeli H., Nagy

A., McLaughlin K.J., Schöler H.R., Tomilin A. 2004. Oct4 is required for primordial

germ cell survival. EMBO Rep. 5: 1078-1083.

6. Tolkunova E., Cavaleri F., Eckardt S., Reinbold R., Christenson L.K., Schöler H.R. ,

Tomilin A. 2006. The caudal-related protein Cdx2 promotes trophoblast differentiation

of mouse ES cells. Stem Cells. 24: 139-144.

7. Malashicheva A., Kanzler B., Tolkunova E., Trono D., Tomilin A. 2007. Lentivirus as a

tool for lineage-specific gene manipulations. Genesis. 45: 456-459.

8. Lengner C.J., Camargo F.D., Hochedlinger K., Welstead G.G., Zaidi S., Gokhale S.,

Schöler H.R., Tomilin A., Jaenisch R. 2007. Oct4 expression is not required for mouse

somatic stem cell self-renewal. Cell Stem Cell. 1: 403–415.

9. Tolkunova A., Malashicheva A., Parfenov V.N., Sustmann C., Grosschedl R., Tomilin A.

2007. PIAS proteins as repressors of Oct4 function. J. Mol. Biol. 374: 1200-1212.

10. Малашичева А.Б., Канцлер Б., Толкунова Е.Н., Троно Д., Томилин А.Н. 2008.

Применение лентивирусов для тканеспецифичных генетических манипуляций.

Цитология. Т.50, No. 4, C 370-375.

11. Толкунова Е.Н., Малашичева А.Б., Чихиржина Е.В., Костылева Е.И., Жен В.,

Луо Ж., Добрински И., Хирхольцер А., Кемлер Р., Томилин А.Н. 2008. E-кадхерин

как новый поверхностный маркер сперматогониальных стволовых клеток.

Цитология. Т.51, No.3, C 212-218.

12. Saxe J., Tomilin А., Schöler H.R., Plath K., Huang J. 2009. Post-translational

regulation of Oct4 transcriptional activity. PLoS One. 4: 1-9.

# - равнозначный вклад