Арефьева Татьяна Игоревна

Научная тема: «МИГРАЦИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ И СПОСОБЫ ЕЕ РЕГУЛЯЦИИ ПРИ АТЕРОСКЛЕРОЗЕ»

Специальность: 03.03.04.

Год: 2013

Отрасль науки: Биологические науки

Основные научные положения, сформулированные автором на основании проведенных исследований:

Основные результаты исследования имеют приоритетный характер. Методами прямой иммунофлуоресценции и поточной цитометрии исследован фенотип лейкоцитов, выделенных из атеросклеротических бляшек коронарных артерий человека; с помощью обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции (ПЦР) выполнен комплексный анализ экспрессии генов цитокинов, в том числе хемокинов, в атеросклеротических бляшках, обнаружена мРНК маркерного для регуляторных Т-клеток белка foxp3. У пациентов с ИБС показано увеличение содержания активатора плазминогена урокиназного типа (урокиназы) в крови и на мембране циркулирующих моноцитов, при нестабильной стенокардии выявлено повышение концентрации МСР-1 в плазме. Получены данные об отрицательной связи между количеством циркулирующих регуляторных Т-лимфоцитов и степенью атеросклеротического поражения коронарных артерий. С использованием выделенных из крови доноров моноцитов, лимфоцитов и нейтрофильных гранулоцитов, эндотелиальных клеток пупочной вены человека, а также клеточных линий и их клонов, различающихся по уровню экспрессии лейкоцитарных β2-интегринов, изучены механизмы хемокин-стимулированной миграции клеток, определены «критические» участники среди молекул адгезии и внутриклеточных сигнальных молекул. Показано, что ведущую роль в МСР-1-зависимой миграции моноцитов на фибриногене играют β2-интегрины CD11c/CD18, в то время как молекулы СD11b/CD18 ответственны за прочное прикрепление клеток к данному матриксу. Обнаружено, что сигнальные каскады, участвующие в миграции клеток в присутствии МСР-1, различаются в моноцитах и эндотелиальных клетках: в хемотаксисе моноцитов задействована митоген-активируемая киназа р38 и киназы семейства src, подвижность эндотелия контролируется фосфатидилинозитол-3-киназой и митоген-активируемыми киназами р42/44 (ERK1/2). Выявлено ингибирующее действие блокатора протеинкиназы mTOR рапамицина на миграцию CD4+лимфоцитов, находящихся в стадии бласттрансформации. По действию на клеточную подвижность в культуре протестировано 15 пептидных фрагментов, соответствующих различным участками первичной структуры молекулы МСР-1; выбраны пептиды с МСР-1-ингибирующим (65-76, пептид Х) и стимулирующим (29-40, пептид IX) действием на миграцию моноцитов in vitro. Противовоспалительная активность пептида Х (Инграмона) продемонстрирована в моделях у грызунов и приматов, а также при введении пациентам с ИБС. Определен механизм подавления миграции клеток в присутствии пептида Х: он связан с вытеснением хемокинов, в частности МСР-1 и ИЛ-8, с сайтов связывания с ГАГ. Показано, что пептид IX стимулирует миграцию моноцитов in vivo, способствует ранозаживлению и обладает кардиопротекторным действием при введении в зону инфаркта у экспериментальных животных.

Список опубликованных работ

1.Глазкова Н.Б., Арефьева Т.И., Антонова О.А., Красникова Т.Л. Действие ингибиторов митоген-активируемых киназ на хемотаксис клеток, стимулированный моноцитарным хемотаксическим белком-1. Российский физиологический журнал им. И.М.Сеченова. 2003, 89(1):43-52.

2.Красникова Т.Л., Арефьева Т.И., Кухтина Н.Б. Хемокины, рецепторы хемокинов и атерогенез. Успехи современной биологии. 2003, 123 (5):506-514.

3.Кухтина Н.Б., Арефьева Т.И., Арефьева А.М., Красникова Т.Л. Зависимость хемотаксического ответа моноцитарных клеток, стимулированных МСР-1, от состава подложки. Российский физиологический журнал им. И.М.Сеченова. 2003, 89 (12): 43-51.

4.Арефьева Т.И., Проваторов С.И., Самко А.Н., Кухтина Н.Б., Антропова Ю.Г., Ильинская О.П., Тарарак Э.М., Красникова Т.Л. Цитофлюориметрический анализ лейкоцитов из нестабильных атеросклеротических бляшек коронарных артерий человека. Приложение к журналу “Кардиоваскулярная терапия и профилактика” 2003, Т.2, №3, С.19.

5.Сидорова М.В., Молокоедов А.С., Арефьева Т.И., Кухтина Н.Б., Красникова Т.Л, Беспалова Ж.Д, Бушуев В.Н. Твердофазный синтез пептидных фрагментов хемокина МСР-1 человека и изучение их биологической активности. Тезисы Российского симпозиума по химии и биологии пептидов, Москва 17-19 ноября 2003, I-38, С.42.

6.Сидорова М.В., Молокоедов А.С., Арефьева Т.И., Кухтина Н.Б., Красникова Т.Л., Беспалова Ж.Д, Бушуев В.Н. Пептидные фрагменты хемокина МСР-1, их структурных аналогов и их влияние на МСР-1-опосредованную миграцию моноцитарных клеток. Биоорганическая химия. 2004, 30(6): 582-593.

7.Arefieva T.; Provatorov S.; Samko A.; Kukhtina N.; Antropova U.; Ilyinskaya O.; Tararak E.; Krasnikova T.. Flow cytometry analysis of leukocytes from coronary atherosclerotic plaques. Journal of Hypertension. 2004. 22(2), рр. 185-186.

8.Krasnikova T.; Sidorova M.; Arefieva T.; Kukhtina N.; Molokoedov A.; Bushuev V. Synthetic peptides corresponding to MCP-1 N- and C-terminal sequences inhibit monocyte migration. Journal of Hypertension. 2004. 22(2). р. 66.

9.Krasnikova T.; Sidorova M.; Arefieva T.; Kukhtina N.; Molokoedov A.; Bushuev V.; Bespalova J. The effects of synthetic peptides corresponding to MCP-1 sequences on monocytic cell migration. European Heart Journal. 2004. 25. р. 143.

10.Н.Б. Кухтина, Т.И. Арефьева, Т.Л. Красникова. Внутриклеточный сигнальный каскад в миграции CD4+ Т-лимфоцитов при действии индуцируемого интерфероном-гамма белка-10. Биохимия, 2005, 70: 790-795.

11.T.I.Arefieva, N.B.Kukhtina, O.А. Antonova, T.L.Krasnikova. MCP-1-stimulated chemotaxis of monocytic and endothelial cells is dependent on activation of different signaling cascades. Cytokine. 2005, 31(6): 439-446.

12.Т.Л. Красникова; Т.И. Арефьева; М.Г. Мелехов; Н.Б. Кухтина; М.В. Сидорова; А.С. Молокоедов; В.Н.Бушуев; Ж.Д. Беспалова; Е.И.Чазов. Пептид последовательности 66-77 моноцитарного хемотаксического белка (МСР-1) - ингибитор воспаления у экспериментальных животных. Доклады академии наук. 2005. 404 (4): 1-4.

13.N. Kukhtina, T. Arefieva, A. Basinkevich, S. Provatorov, R. Shakhnovich, T. Krasnikova. The number of circulating plasmacytoid dendritic cells is decreased in acute coronary event. Journal of Hypertension. 2005. 23 (suppl 2): S366.

14.Красникова Т.Л.; Сидорова М.В.; Молокоедов Ф.С.; Арефьева Т.И.; Кухтина Н.Б. Мелехов М.Г.; Беспалова Ж.Д. Новый додекапептид из С-концевого домена моноцитарного хемотаксического белка (МСР-1) - ингибитор воспаления. II Российский симпозиум по химии и биологии пептидов Санкт-Петербург, 25-27 мая 2005г. Тезисы докладов и стендовых сообщений. 2005. С. 75.

15.М.В. Сидорова; А.С. Молокоедов; Ф.Ф. Азьмуко; Т.И. Арефьева; М.Г. Мелехов; Н.Б. Кухтина; Т.Л. Красникова; Ж.Д. Беспалова; В.Н. Бушуев. Пептидный фрагмент (66-77) моноцитарного хемотаксического белка 1 и его ретро-энантио-аналог ингибируют миграцию клеток in vivo и in vitro. Биоорганическая химия. 2006. 32: 161-168.

16.Е.И. Чазов; Т.Л. Красникова; Ж.Д. Беспалова; Н.Б. Кухтина; М.Г. Мелехов; Т.И. Арефьева; М.В. Сидорова; А.С. Молокоедов; Т.Е. Гвоздик; Б.М. Мартьянов; В.В. Поздеев; В.Б. Сергиенко; Т.Л. Бушуева. Ингибирование миграции моноцитов и гранулоцитов in vivo пептидом последовательности 65-76 моноцитарного хемотаксического белка-1 (МСР-1). Доклады академии наук. 2006. 411: 1-3.

17.С.И. Проваторов, Т.И. Арефьева, Н.Б. Кухтина, Т.К. Люкова, А.М. Арефьева, Т.Л. Красникова. Маркеры воспаления - моноцитарный хемотаксический белок-1 (МСР-1) и С-реактивный белок - в крови пациентов с нестабильной стенокардией и стабильной стенокардией напряжения. Терапевтический архив. 2006, 6: 66-69.

18.Krasnikova T., Kukhtina N., Arefieva T., Martianov B., Sidorova M., Molokoedov A., Bespalova Z. MCP-1 C-terminus (66-77) peptide is an inhibitor of inflammation. Bioscience 2006 Scientific Programm and Abstracts, 23-27 July, SECC, Glasgow, UK 2006. p. 144.

19.N.B. Kukhtina, R.S. Akchurin, T.I. Arefieva, T.L. Krasnikova. Different cytokine expression profiles in atherosclerotic plaques and aorta from patients with CAD. Journal of Hypertension. 2006. s377.

20.T.I. Arefieva, S.I. Provatorov, N.B. Kukhtina, T.K. Liukova, A.M. Arefieva, T.L. Krasnikova. Plasma levels of CRP and MCP-1 in patients with stable and unstable angina. Journal of Hypertension. 2006. 24. S380.

21.Chazov EI, Bespalova JD, Arefieva TI, Kukhtina NB, Sidorova MV, Provatorov SI, Krasnikova TL. The peptide analogue of MCP-1 65-76 sequence is an inhibitor of inflammation. Can J Physiol Pharmacol. 2007; 85(3-4): 332-40.

22.Красникова Т.Л., Н.Б. Кухтина, Т.И. Арефьева, М.В. Сидорова, А.А.Азьмуко, А.С.Молокоедов, Е.В.Арзамасцев, К.И. Малиновская, Ж.Д. Беспалова. Инграмон – С-терминальный фрагмент (65-76) моноцитарного хемотаксического белка -1 (МСР-) – новый потенциальный противовоспалительный препарат, Доклад на III Российском симпозиуме “Белки и пептиды”, Пущино, 2007.

23.Кухтина Н.Б., Баштрыков П.П., Арефьева Т.И., Соколов В.О., Красникова Т.Л. Синтетический фрагмент 65-76 моноцитарного хемотаксического белка -1 (инграмон) ингибирует формирование неоинтимы у крыс. Доклад на III Российском симпозиуме “Белки и пептиды”, Пущино, 2007.

24.Н. Б. Кухтина, П. П. Баштрыков, Беспалова Ж.Д., Сидорова М.В., Т. И. Арефьева, В.О.Соколов, Т. Л. Красникова. Влияние синтетического фрагмента 65-76 МСР-1 на формирование неоинтимы после баллонного повреждения у крыс. Российский физиологический журнал им. И.М.Сеченова. 2008, 94(1): 27-36.

25.Н.Б. Кухтина, Т.И. Арефьева, А.М. Арефьева, Р.С. Акчурин, Т.Л. Красникова. Экспрессия хемокинов и цитокинов в атеросклеротических бляшках и интиме артерий у больных ИБС. Терапевтический архив. 2008, 4:63-69.

26.Красникова Т.Л., Н.Б. Кухтина, Т.И. Арефьева, М.В. Сидорова, А.А.Азьмуко, А.С.Молокоедов, Е.В.Арзамасцев, К.И. Малиновская, Ж.Д. Беспалова. Разработка противовоспалительных пептидных препаратов- антагонистов хемокинов. Доклад на симпозиуме “Результаты фундаментальных и прикладных исследований для создания новых лекарственных средств”, Москва, 2008.

27. Kukhtina NB, Bashtrykov PP, Bespalova ZhD, Sidorova MV, Aref’eva TI, Sokolov VO, Krasnikova TL. Effects of synthetic monocyte chemotactic protein – 1 fragment 65-76 on neointima formation after carotid artery balloon injury in rats. Neurosci Behav Physiol. 2009, 39:153-159.

28.Красникова Т.Л., Сидорова М.В., Арефьева Т.И., Кухтина Н.Б., Азьмуко А.А., Беспалова Ж.Д. Разработка нового пептидного противовоспалительного пептидного препарата – ингибитора моноцитарного хемотаксического белка -1 (МСР-1). Российский физиологический журнал им. И.М.Сеченова. 2009, 95(5): 494-506.

29.Арефьева Т.И, Проваторов С.И., Потехина А.В., В.О.Соколов, Кухтина Н.Б., Самко А.Н., Красникова. Влияние имплантации содержащих рапамицин стентов в коронарные артерии на количество циркулирующих CD4+CD25 high + - регуляторных Т- клеток. Терапевтический архив. 2009, 9:33-37.

30.Соколов В.О., Красникова Т.Л., Прокофьева Л.В., Кухтина Н.Б., Арефьева Т.И. Экспрессия маркеров регуляторных CD + CD25+foxp3+ клеток в атеросклеротических бляшках коронарных артерий человека. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2009, 147(8): 667-670.

31.Т Potekhina A., V.Sokolov, E.Pylaeva, S.Provatorov, N.Kukhtina, T.Krasnikova, T.Arefieva. Circulating CD4+CD25 high + CD127 low regulatory T-cells after coronary stenting with rapamycin-eluting stents. 8th International congress on coronary artery disease from prevention to infection. October 11-14 , 2009 , Prague, Czech Republic.

32.Красникова Т.Л., Никитин П.И., Ксеневич Т.И., Горшков Б.Г., Сидорова М.В., Азьмуко.А.А., Арефьева Т.И., Кухтина Н.Б., Беспалова Ж.Д. Анализ влияния фрагмента (65-76) С-концевого домена моноцитарного хемотаксического белка -1 (МСР-1) Инграмона на взаимодействие МСР-1 с гепарином. Тезисы IV Российского симпозиума “Белки и пептиды’, Казань, 23-27 июня, стр.78, 2009.

33.V.Sokolov. T.Krasnikova, L. Prokofieva, T.Arefieva. Regulatory (foxp3+) T-cells in human coronary atherosclerotic lesions. Abstracts of 19th European Meeting on Hypertension, Milan, June 12-16, p. S93. 2009.

34.Т.Л. Красникова, П.И. Никитин, Т.И. Ксеневич, Б. Г. Горшков, М.В. Сидорова, А.А. Азьмуко, Т.И. Арефьева, Е.Н. Мамочкина, Е.Е. Ефремов, Ж.Д. Беспалова. Влияние пептидного фрагмента (65-76) С-концевого домена моноцитарного хемотаксического белка-1 (МСР-1) на взаимодействие МСР-1 с гепарином. Доклады академии наук. 2010, 433 (4): 559-562.

35.А.В. Потехина, С.И. Проваторов, Т.И. Арефьева, Н.Б. Кухтина, В.П. Масенко, Е.И. Казначеева, Н.Ю. Рулева, Е.А. Ноева, М.К. Осяева, М.В.Сидорова, Ж.Д. Беспалова, Т.Л.Красникова. Влияние противовоспалительного пептидного препарата Инграмон на содержание белков острой фазы воспаления и хемокинов в крови больных после коронарного стентирования. Терапевтический архив. 2010, 11: 58-62.

36.V.Sokolov, A. Potekhina, E.Pylaeva, S.Provаtorov, N.Kukhtina, T.L. Krasnikova, T. Arefieva. Circulating CD4CD25highCD127low regulatory T-cells after intracoronary implantation of rapamycin-eluting stents. 20thEuropean Meeting on Hypertention and Cardiovascular prevention, 18-21 June 2010, Oslo, Norway

37.E.Pylaeva, A. Potekhina, V.Sokolov, S.Provotorov, V.P.Masenko, N.Kukhtina, T.L. Krasnikova, E. Noeva, T. Arefieva. The dynamics of blood lymphocyte subpopulations after coronary stenting with rapamycin eluting stents. ESC Congress 2010, 28 August - 1 September, Stockholm, Sweden

38.Красникова Т.Л., Кухтина Н.Б., Арефьева Т.И., Соколов В.О., Рулева Н.Ю., Пылаева Е.А., Азьмуко А.А., Сидорова М.В., Беспалова Ж.Д. Пептидный фрагмент 29-40 аминокислотной последовательности моноцитарного хемотаксического белка -1 (МСР-1) стимулирует миграцию моноцитов Тезисы V Всероссийского симпозиума «Белки и пептиды», Петрозаводск 2011.

39.Кухтина Н.Б., Арефьева Т.И., Рулева Н.Ю., Беспалова Ж.Д., Сидорова М.В., Красникова Т.Л. Пептидные фрагменты фракталкина (CX3CL1) как перспективные лекарственные препараты Тезисы V Всероссийского симпозиума «Белки и пептиды», Петрозаводск 2011.

40.Т.Л. Красникова, П.И. Никитин, Т.И. Ксеневич, Б.Г. Горшков, Т.Л. Бушуева, Т.И. Арефьева, Н.Ю. Рулева, М.В. Сидорова, А.А. Азьмуко, Ж.Д. Беспалова. Ингибитор воспаления, пептидный фрагмент (65-76) моноцитарного хемотаксического белка-1 (МСР-1) препятствует связыванию МСР-1 с гепарином. Биологические мембраны, 2011, 28(1): 68-76.

41.А.В. Потехина, В.О. Соколов, Е.А. Пылаева, С.И. Проваторов, В.П. Масенко, Е.Г. Босых, Е.А. Ноева, Т.Л. Красникова, Т.И. Арефьева. Изменения субпопуляционного состава лимфоцитов в крови больных после ангиопластики коронарных артерий с имплантацией стентов с рапамициновым покрытием. Кардиология. 2011, 51(3):47-53.

42.Arefieva TI, Krasnikova TL, Potekhina AV, Ruleva NU, Nikitin PI, Ksenevich TI, Gorshkov BG, Sidorova MV, Bespalova ZD, Kukhtina NB, Provatorov SI, Noeva EA, Chazov EI. Synthetic peptide fragment (65-76) of monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1) inhibits MCP-1 binding to heparin and possesses anti-inflammatory activity in stable angina patients after coronary stenting. Inflamm Res. 2011, 60(10):955-964. .

43.Potekhina AV, Provatorov SI, Sokolov VO, Pylaeva EA, Masenko VP, Noeva EA, Kukhtina NB, Krasnikova TL, Arefieva TI. CD4(+)CD25(high)CD127(low) regulatory T cells in patients with stable angina and their dynamics after intracoronary sirolimus-eluting stent implantation. Hum Immunol. 2011;72(7):553-557.

44.Кухтина Н.Б., Руткевич П.Н., Шевелев А.Я., Власик Т.Н., Арефьева Т.И. Участие бета-2-интегринов CD11b/CD18 и CD11c/CD18 в адгезии и миграции клеток на фибриногене. Российский физиологический журнал им. И.М.Сеченова. 2011, Т.97, №6, С.601-608.

45.Красникова Т.Л., Кухтина Н.Б., Арефьева Т.И., Соколов В.О., Рулева Н.Ю., Пылаева Е.А., Азьмуко А.А., Сидорова М.В., Беспалова Ж.Д. Пептидный фрагмент 29-40 аминокислотной последовательности моноцитарного хемотаксического белка -1 (МСР-1) стимулирует миграцию моноцитов. Тезисы V Всероссийского симпозиума «Белки и пептиды», Петрозаводск 2011.

46.Кухтина Н.Б., Арефьева Т.И., Рулева Н.Ю., Беспалова Ж.Д., Сидорова М.В., Красникова Т.Л. Пептидные фрагменты фракталкина (CX3CL1) как перспективные лекарственные препараты. Тезисы V Всероссийского симпозиума «Белки и пептиды», Петрозаводск 2011.

47.Кухтина Н.Б., Арефьева Т.И., Рулева Н.Ю., Сидорова М.В., Азьмуко А.А, Беспалова Ж.Д., Красникова Т.Л. Пептидные фрагменты хемокинового домена фракталкина: влияние на миграцию моноцитов человека. Биоорганическия химия. 2012, 38(6):660-666.

48.Т. И. Арефьева, В. О. Соколов, Е. А. Пылаева, Н. Б. Кухтина, А. В. Потехина, Н. Ю. Рулева, М. В. Сидорова, Ж. Д. Беспалова, А. А. Азьмуко, Т. Л. Красникова. Пептидный фрагмент 29-40 аминокислотной последовательности моноцитарного хемотаксического белка-1 (МСР-1) стимулирует миграцию моноцитов in vivo и способствует ранозаживлению. Доклады академии наук. 2012, 446(1):106-109.

49.Красникова Т.Л., Беспалова Ж.Д., Сидорова М.В., Азьмуко А.А., Арефьева Т.И.,

Рулева Н.Ю., Гаврилова С.А., Ахметшина М.Р., Бердалин А.Б., Буравков С.В. Пептидный фрагмент (29-40) хемокина МСР-1 ускоряет ранозаживление. Тезисы VI Всероссийского симпозиума «Белки и пептиды», Уфа 2013.

50.A. Potekhina, E. Pylaeva, K. Raskina, A. Kuranova, S. Provatorov, E. Noeva, T. Arefieva The balance of T-regulatory and T-helper 1 and 17 lymphocyte subsets in blood of patients with coronary atherosclerosis. 81 EAS Congress, 2013, Lyon, France

Патенты:

1.Чазов Е.И., Беспалова Ж.Д., Азьмуко А.А., Сидорова М.В., Молокоедов А.С., Красникова Т.Л., Арефьева Т.И., Кухтина Н.Б.. Способ получения додекапептида и трипептид лдля его осуществления. Патент 2340626.

2.Азьмуко А.А., Арефьева Т.И., Беспалова Ж.Д., Красникова Т.Л., Кухтина Н.Б., Молокоедов А.С., Палькеева М.Е., Рулева Н.Ю., Сидорова М.В., Соколов В.О.. Пептид для ингибирования фракталкин-стимулированной миграции моноцитарных клеток. Патент 2461565.