- Метод количественного электронно-микроскопического исследования сперматозоидов может применяться для выявления ультраструктурных нарушений морфологии сперматозоидов у пациентов с патоспермией и для оценки функционального состояния сперматозоидов у пациентов с идиопатическим бесплодием и у пациентов, в анамнезе жен которых имеется спонтанное прерывание беременности. Применение электронно-микроскопического исследования позволяет выяснить механизмы фертилизационной неэффективности сперматозоидов, идентифицировать генетически обусловленные и приобретенные формы патоспермии у пациентов с патоспермией и при идиопатическом нарушении фертильности.
- У пациентов с идиопатическим бесплодием с помощью количественного электронно-микроскопического анализа выявлено повышенное содержание сперматозоидов с недостаточно конденсированным «незрелым» хроматином и аномалии акросомы и постакросомальной зоны.
- Выявлен новый тип синдромной патоспермии, при котором имеется следующая совокупность симптомов: идиопатическое бесплодие при нормозооспермии, тотальное нарушение ультраструктуры центриолей сперматозоидов - разделение микротрубочек в центриолярных триплетах; тотальная остановка на 2-3 сутки развития эмбрионов, полученных с помощью интрацитоплазматиченской инъекции сперматозоидов.
- Вирусоподобные инородные включения, содержащиеся в сперматозоидах и идентифицированные как капсиды вируса простого герпеса, обнаружены в кариоплазме ядер сперматозоидов, в перинуклеарном пространстве и в районе пор ядерной оболочки.
- В подвижных сперматозоидах нормальной морфологии выявлена ДНК вируса простого герпеса. Наличие вирусной ДНК в подвижных сперматозоидах с нормальной морфологией позволяет сделать заключение о возможности оплодотворения инфицированными сперматозоидами.
- Изменение количественного состава незрелых половых клеток, отсутствие анеуплоидии и отсутствие выраженных изменений в параметрах традиционного спермиологического обследования и в параметрах количественного электронно-микроскопического анализа сперматозоидов позволяет сделать заключение о том, что на стадии сперматогенеза происходит селекция поврежденных при инфицировании клеток. В то же время не все инфицированные клетки подвергаются селекции, так как с помощью гибридизации in situ ДНК вируса простого герпеса обнаружена во фракции подвижных сперматозоидов с нормальной морфологией.
2.Брагина Е.Е., Абдумаликов Р.А., Бочарова Е.Н., Кущ А.А, Гребенча С.В., Курило Л.Ф. Внутриклеточное инфицирование сперматозоидов человека вирусами группы герпеса //Андрология и генитальная хирургия. – 2002, № 3. – С. 81-82.
3.Курило Л.Ф., Дмитриев Г.А., Щетинин В.В., Брагина Е.Е., Бушманов А.Ю., Абдумаликов Р.А., Шилейко Л.В., Бочарова Е.Н., Юрасов С.В. Электронномикроскопическое исследование сперматозоидов как функциональный тест при диагностике мужского бесплодия // Методические рекомендации. – М., 2003. – 23 с.
4.Курило Л.Ф., Масюкова С.А., Щетинин В.В., Брагина Е.Е., Бушманов А.Ю., Гладько В.В., Абдумаликов Р.А., Бармина Г.В., Бочарова Е.Н., Зудин А.Б., Бочарова Е.Н., Шилейко Л.В., Алиева С.Н., Юрасов С.В. Диагностика урогенитального герпеса с помощью реакции иммунофлюоресценции. Выявление сперматозоидов, инфицированных вирусом простого герпеса // Методические рекомендации. – М., 2003. – 19 с.
5.Бочарова Е.Н., Абдумаликов Р.А., Брагина Е.Е., Климова Р.Р., Адуева С.М., Меджидова М.Г., Курило Л.Ф., Кущ А.А. Обнаружение белков и капсидов вируса простого герпеса в сперматозоидах человека // Доклады академии наук. – 2003. – Т. 391, № 6. – С. 836-841.
6.Бочарова Е.Н., Брагина Е.Е., Климова Р.Р., Адуева С.М., Меджидова М.Г., Курило Л.Ф., Кущ А.А. Выявление вируса простого герпеса в эякуляте у мужчин, не имеющих клинических симптомов урогенитального герпеса // Материалы Первого Российского конгресса дерматовенерологов (23-26 сентября 2003 г.). – С-Пб., 2003. – С. 152.
7.Брагина Е..Е., Бочарова Е.Н., Курило Л.Ф., Шилейко Л.В., Юров Ю.Б., Ворсанова С.Г.Использование FISH метода в генетическом консультировании для выявления анеуплоидий хромосом при вирусном инфицировании сперматозоидов // Материалы Второго конгресса «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии» (15-17 октября 2003 г.). – М., 2003. – С. 136.
8.Брагина Е..Е., Курило Л.Ф., Абдумаликов Р..А., Бочарова Е.Н., Михайлова Е.М., Гришина Е.М., Шилейко Л.В., Сорокина Т.М. Множественные дефекты ультраструктурной организации жгутика сперматозоида у пациента с абсолютной астенозооспермией // Проблемы репродукции. – 2004. – Т. 10, № 1. – С. 66-69.
9.Бочарова Е.Н., Климова Р.Р., Завалишина Л.Э., Петров А.Н., Брагина Е.Е., Кущ А.А. Выявление ДНК вируса простого герпеса в сперматозоидах человека методом гибридизации in situ // Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Медицинская микробиология – ХХI век». Саратов, (28-30 сентября). – Саратов, 2004. – С. 44-45.
10.Брагина Е.Е., Бочарова Е.Н., Климова Р.Р., Завалишина Л.Э., Ашапкин В.В., Петров А.Н., Кущ А.А. Выявление ДНК вируса простого герпеса в сперматозоидах человека методом гибридизации in situ // Материалы I Международной конф. «Молекулярная медицина и биобезопасность» (26-28 октября 2004г.). – М., 2004. – С. 35-36.
11.Брагина Е.Е., Шилейко Л.Ф., Курило Л.Ф., Гусак Ю.К., Кущ А.А., Бочарова Е.Н. Количественное электронно-микроскопическое исследование сперматозоидов и его прогностическое значение при нарушениях фертильности мужчин // Материалы 3-го Российского научного форума «Мужское здоровье и долголетие» (16-18 февраля 2005г.). – М., 2005. – С. 38.
12.Бочарова Е.Н., Брагина Е.Е., Гусак Ю.К., Зыкова М.С., Лихаев Д.Н., Зотов В.В., Терещенко А.Б., Шилейко Л.В., Курило Л.Ф., Климова Р.Р., Кущ А.А. Спонтанное прерывание беременности, неудачи при использовании репродуктивных технологий и герпетическое инфицирование сперматозоидов // Андрология и генитальная хирургия. – 2006. – № 1. – С. 59-65.
13.Бочарова Е.Н., Брагина Е.Е., Гусак Ю.К., Зыкова М.С., Лихаев Д.Н., Шилейко Л.В., Курило Л.Ф., Климова Р.Р., Кущ А.А. Спонтанное прерывание беременности, неудачи при использовании репродуктивных технологий и герпетическое инфицирование сперматозоидов // Материалы 4-го Российского научного форума «Мужское здоровье и долголетие» (15-17 февраля 2006г). – М., 2006. – С. 22.
14.Абдумаликов Р.А. Бочарова Е.Н. Антигерпетическая терапия субклинических форм генитального герпеса с использованием пептидных биорегуляторов // Натуротерапия и гомеопатия. – 2006. – № 2 (9). – С. 16-20.
15.Абдумаликов Р.А., Бочарова Е.Н., Брагина Е.Е. Антигерпетическая терапия пептидными биорегуляторами у лиц с герпетическим инфицированием сперматозоидов // Натуротерапия и гомеопатия. – 2006. – № 2 (9). – С. 34-37.
16.Кущ А.А., Климова Р.Р., Бочарова Е.Н., Брагина Е.Е., Зыкова М.С., Лихаев Д.Н., Абдулмеджидова А.Г., Курило Л.Ф., Хилькевич Л.В., Скорова Н.Е. Инфицирование сперматозоидов вирусом простого герпеса при идиопатическом бесплодии в браке // Материалы международной конференции по андрологии (24-26 мая 2006г., Дагомыс) / Андрология и генитальная хирургия. – 2006. – С. 32.
17.Бочарова Е.Н. Вирусное инфицирование сперматозоидов //Проблемы репродукции. – 2006. – Т. 12, № 5. – С. 75-79.
18.Алиева П.М., Алиева С.А., Масюкова С.А., Бочарова Е.Н., Брагина Е.Е. Выявление вирионов вируса простого герпеса в эпителии шейки матки пациенток, страдающих генитальным герпесом, в межрецидивный период //Клиническая дерматология и венерология. – 2006. – № 4. – С. 23-27.
19.Бочарова Е.Н., Шилейко Л.В., Брагина Е.Е., Климова Р.Р., Кущ А.А., Курило Л.Ф.Нарушение сперматогенеза человека: количественное исследование состава незрелых половых клеток при инфицировании сперматозоидов вирусом простого герпеса // Проблемы репродукции. – 2006. – Т. 12, № 6. – С. 75-80.
20.Бочарова Е.Н. Завалишина Л.Э., Брагина Е.Е., Климова Р.Р., Гусак Ю.К., Курило Л.Ф., Шилейко Л.В., Петров А.Н., Франк Г.А., Кущ А.А. Выявление геномной ДНК вируса простого герпеса методом гибридизации in situ в сперматозоидах человека при нарушении фертильности // Доклады академии наук. – 2007. – Т. 412, № 3. – С.417–421.
21.Бочарова Е.Н., Завалишина Л.Э., Брагина Е.Е., Климова Р.Р., Гусак Ю.К., Курило Л.Ф., Шилейко Л.В., Петров А.Н., Франк Г.А., Кущ А.А. Выявление геномной ДНК вируса простого герпеса методом гибридизации in situ в сперматозоидах человека при бесплодии // Материалы 4-го Российского научного форума «Мужское здоровье и долголетие» (20-22 февраля 2007г). – М., 2007. – С. 28-29.
22.Bocharova E.N. Herpesvirus infection of male gametes // International scientific-practical interdisciplinary workshop “New Technology in Medicine and Experimental Biology” (26 February-08 March, 2007). – Pattaya-Bangkok, Thailand, 2007. – P. 16.
23.Алиева П.М., Алиева С.А., Бочарова Е.Н., Масюкова С.А., Брагина Е.Е. Выявление вируса простого герпеса в цервикальном эпителии женщин в межрецидивный период при генитальном герпесе // Материалы первого регионального научного форума «Мать и дитя» (20-22 марта 2007г.). – Казань, 2007. – С. 196.
24.Бочарова Е.Н., Брагина Е.Е., Гусак Ю.К. Количественное ультраструктурное исследование сперматозоидов человека при нарушении фертильности // Вестник новых медицинских технологий. – 2007. – Т XIV, № 4. – С. 199-201.
25.Бочарова Е.Н. Генетически обусловленная ультраструктурная патология сперматозоидов // Вестник новых медицинских технологий. – 2008. – Т XV, № 1. – С. 52-55.
26.Бочарова Е.Н., Брагина Е.Е., Гусак Ю.К., Зотов В.В., Терещенко А.Б., Шилейко Л.В., Курило Л.Ф., Климова Р.Р., Кущ А.А. Герпетическое инфицирование сперматозоидов при неудачах использования репродуктивных технологий и спонтанном прерывании беременности // Урология. – 2007, № 3. – С. 59-63.
27.Брагина Е.Е., Бочарова Е.Н., Гусак Ю.К. Электронно-микроскопические исследования при нарушениях фертильности // Материалы 4-ой конференции с международным участием "Малоинвазивные методы диагностики и лечения в современной урологии"(26–27 апреля 2007). – С.-Петербург, 2007. – С. 56-58.
28.Грибенча С.В., Брагина Е.Е., Абдумаликов Р.А., Бочарова Е.Н., Курило Л.Ф. Выявление антигена вируса простого герпеса второго типа в клетках сперматогенного эпителия инфицированных тестикул морских свинок // Бюллетень экспериментальной биологии медицины. – 2007. – № 7. – С. 79-83.
29.Брагина Е.Е., Бочарова Е.Н., Гусак Ю.К. Прогностическое значение ультраструктурного исследования сперматозоидов при нарушениях фертильности мужчин и при криоконсервации гамет // Материалы XVII ежегодной международной конференции РАРЧ «Репродуктивные технологии сегодня и завтра» (6-8 сентября 2007 г.). – Казань, 2007. – С. 61.
30.Бочарова Е.Н., Курило Л.Ф., Шилейко Л.В., Брагина Е.Е., Юров Ю.Б., Ворсанова С.Г., Юров И.Ю., Климова Р.Р., Кущ А.А. Анализ популяции половых клеток в эякуляте мужчин, инфицированных вирусом простого герпеса // Онтогенез. – 2008. – Т. 39, № 1. – С. 47-57.
31.Бочарова Е.Н., Завалишина Л.Э., Брагина Е.Е., Климова Р.Р., Гусак Ю.К., Курило Л.Ф., Шилейко Л.В., Петров А.Н., Франк Г.А., Кущ А.А. Использование метода гибридизации in situ для выявления геномной ДНК вируса простого герпеса в сперматозоидах человека при нарушении фертильности // Материалы I международной конференции «Проблемы диагностики, лечения и профилактики герпесвирусных инфекций» (24-26 марта 2008г.). – М., 2008. – С. 17-19.
32.Bocharova E.N., Bragina E.E., Gusak Yu.K. Investigation of human sperm cells infertility disorders by quantitative ultrastrutural analysis // International scientific-practical interdisciplinary workshop «New technology in medicine and experimental biology» (07-19 March). – Singapore-Bali, 2008. – P. 12-13.