Научная тема: «НЕЙРОПРОТЕКТИВНОЕ ДЕЙСТВИЕ КЛЮЧЕВЫХ ПРОТЕИНАЗ ГЕМОСТАЗА»
Специальность: 03.00.13
Год: 2008
Отрасль науки: Биологические науки
Основные научные положения, сформулированные автором на основании проведенных исследований:

1.      Протеиназы гемостаза в зависимости от концентрации могут вызывать как протекторное, так и повреждающее действие на клетки нервной системы. Тромбин, ФХа и АРС в узком диапазоне низких концентраций (пМ - нМ), не достаточных для участия в процессах свертывания крови, защищают гиппокампальные и кортикальные нейроны от гибели, вызванной высокими концентрациями глутамата. Высокие концентрации протеиназ вызывают гибель нейронов, сопоставимую с действием токсических концентраций глутамата.

2.      Рецепторы, активируемые протеиназами, необходимы для реализации протекторного действия протеиназ системы гемостаза. Для нейропротекторных эффектов протеиназ необходима протеолитическая активность ферментов. Тромбин защищает гиппокампальные и кортикальные нейроны от глутаматной эксайтотоксичности через PAR1, ФХа - через неизвестный подтип PAR. Два рецептора – EPCR (эндотелиальный рецептор протеина С) и PAR1 необходимы для нейропротекторного действия АРС на нейроны мозга крыс при эксайтотоксичности.

3.      Тромбин через PAR1 вызывает быстрое и транзиторное увеличение внутриклеточного кальция в гиппокампальных и кортикальных нейронах механизмом, опосредуемым преимущественно через IP3-рецепторы эндоплазматического ретикулума.

4.      Прединкубация клеток с тромбином или ФХа повышает количество нейронов, восстанавливающих низкий уровень внутриклеточного кальция после действия высоких концентраций глутамата.

5.       Действие токсических концентраций глутамата и тромбина на нейроны гиппокампа вызывает транслокацию в ядро одной из субъединиц NF-kBNF-kBp65. Hизкиe концентрации протеиназ стабилизируют цитоплазматический комплекс NF-kB. АРС защищает нейроны от гибели, блокируя активацию NF-kB в нейронах, вызванную токсическими воздействиями.

6.      Рецепторы, активируемые протеиназами, обладают высокой пластичностью и, в зависимости от состояния нейрона, изменяется их экспрессия. Соотношение подтипов PAR различно в коре и гиппокампе, что может определять и их разную чувствительность к протеиназам. Экспрессия подтипов PAR зависит от возраста нейронов. Протеиназы гемостаза осуществляют контроль экспрессии собственных рецепторов PAR в нейронах мозга по принципу обратной связи.

7.      Протекторное действие протеиназ на клетки мозга при повреждении и эксайтотоксичности позволяет отнести их к клеточным регуляторам физиологических и патофизиологических процессов.

Список опубликованных работ
1.Горбачева Л.Р., Сторожевых Т.П., Киселева Е.В., Пинелис В.Г., Струкова С.М. Рецепторы первого типа, активируемые протеиназами, участвуют в механизмах защиты нейронов гиппокампа крысы от токсического действия глутамата.// Бюлл.эксп.биол.мед., 2005, 139(9), C.265-268.

2.Storozhevykh T., Gorbacheva L., Kiseleva E., Pinelis V., Strukova S. PARs ( Protease Activated Receptors) Activation By Thrombin And Factor Xa Protects Hippocampal Neurons Against Glutamate-induced Apoptosis.// J Thromb Haemost., 2005, 3, P.2349.

3.Сторожевых Т.П., Киселева Е.В., Горбачева Л.Р., Пинелис В.Г., Струкова С.М. Тромбин защищает культивируемые нейроны гиппокампа крысы от апоптоза, вызванного глутаматом.// Сб. матер. конф. «Нейрохимия: фундаментальные и прикладные аспекты». Москва (14-16 марта), 2005, C. 200.

4.Горбачева Л.Р., Сторожевых Т.П., Киселева Е.В., Пинелис В.Г., Струкова С.М. Новые нейротропные функции протеиназ системы свёртывания крови: фактора Xa и тромбина.// Матер. Всеросс. конф. "Тромбозы,геморрагии,ДВС-синдром", Ярославль(12-14октября), 2005, C.27-29.

5.Русанова А.В., Умарова Б.А., Горбачева Л.Р., Сидорова Е.И., Васильева Т.В., Марквичева Е.А., Грандфис К., Струкова С.М. Протекторное действие пептида-агониста рецептора тромбина(PAR1-АР) в модели язвы желудка у крыс.// Матер. Всеросс. конф. «Тромбозы, геморрагии, ДВС-синдром". Ярославль(12-4октября), 2005, C.91-93.

6.Горбачева Л.Р., Сторожевых Т.П., Киселева Е.В., Пискунов А.К., Пинелис В.Г., Струкова С.М. Фактор Xa свертывания крови защищает гиппокампальные нейроны от глутаматной цитотоксичности.// Науч. труды I Съезда физиологов СНГ (Сочи, Дагомыс,19-23сент), 2005, Т.1, N 89, C.36.

7.Горбачева Л.Р., Сторожевых Т.П., Киселева Е.В., Пинелис В.Г., Струкова С.М. Рецепторы, активируемые протеиназами вносят вклад в выживаемость гиппокампальных нейронов.// Матер. междунар. симпозиума «Механизмы адаптивного поведения». Санкт-Петербург, Колтуши (7 -9 декабря), 2005,.C. 87-88.

8.Горбачева Л.Р., Сторожевых Т.П., Киселева Е.В., Пинелис В.Г., Струкова С.М. Сериновые протеиназы- фактор Xa и тромбин защищают нейроны гиппокампа от глутаматной цитотоксичности.// Матер. Междунар. конф. «Рецепция и внутриклеточная сигнализация». Пущино (6-9 июня), 2005, C.120- 122.

9.Русанова А.В., Умарова Б.А., Горбачева Л.Р., Васильева Т.В., Ланге М.А., Грандфис К.,. Марквичева Е.А., Струкова С.М. PAR1 - агонист пептид, биоинкапсулированный в микрочастицы, вызывает ускорение репарации тканей на модели язвы желудка у крыс.// Научные труды I Съезда физиологов СНГ. Сочи,Дагомыс (19-23сент), 2005, Т. 2, N 505, C.178.

10.Gorbacheva L., Storozhevykh T., Kiseleva E., Pinelis V., Smirnov M., Strukova S. Protease activated receptors (PARs) involved in protection of neurons from glutamate toxicity.// Abstracts of the 3rd Neuron Satellite Meeting, Neurons and Sensory System. Washington DC (Nov10-11), 2005, P.90.

11.Strukova S.M., Kiseleva E.V., Storozhevykh T.P., Gorbacheva L.R., Pinelis V.G. The connection between coagulation and inflammation:impact of protease and protease activated receptors.// Матер. II-ой всеросс. науч. конф. «Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии»( с международным участием). Москва(2-4 февраля), 2005, С. 318-319.

12.Strukova S., Gorbacheva L., Storozhevykh T., Pinelis V., Smirnov M. Factor Xa like to thrombin can protect hippocampal neurons from glutamate toxicity.// J.Thromb.Haemost., 2006, 4(6), Р. 1409-1410.

13.Горбачева Л.Р., Сторожевых Т.П., Пинелис В.Г., Ишивата С., Струкова С.М. Модуляция тромбином и фактором Xa выживаемости гиппокампальных нейронов.// Биохимия. 2006, 71(10), С. 1338-1346.

14.Русанова А.В., Макарова А.М., Марквичева Е.А., Горбачева Л.Р., Сташевская К.C., Васильева Т.В., Сидорова E.И., Беспалова Ж.Д., Грандфис К., Струкова С.М. Пептид - агонист рецептора тромбина, иммобилизованный в микросферы, ускоряет репаративные процессы в модели язвы желудка у крыс.// Бюлл.эксп.биол.мед., 2006, 142(7), С. 42-46.

15.Макарова А.М., Русанова А.В., Горбачева Л.Р., Умарова Б.А., Струкова С.М. Влияние активированного протеина С на секреторную активность перитонеальных тучных клеток крысы.// Бюлл.эксп.биол.мед., 2006, 142(10), С. 382-385.

16.Сташевская К.С., Марквичева Е.А., Русанова А.В., Макарова А.М, Горбачева Л.Р., Прудченко И. А., Зубов В.П., Грандфис К., Струкова С.М. Биодеградируемые микрочастицы с иммобилизованным пептидом для заживления ран.// Биомедицинская химия, 2006, 52(1), С. 83-94.

17.Горбачева Л.Р., Сторожевых Т.П., Киселева Е.В., Пинелис В.Г., Струкова С.М. Новые нейропротекторные эффекты протеиназ системы свертывания крови- тромбина и фактора Xa.// «Неврология длиною в жизнь» (под ред И.Д. Стулина), Изд-во МГМСУ, Москва, 2006, С. 176-179.

18.Струкова С.М., Горбачева Л.Р., Сторожевых Т.П., Пинелис В.Г. Нейропротективные свойства агонистов рецепторов, активируемых протеиназами.// Матер. Московской междунар. конф. «Биотехнология и медицина». Москва (14-17 марта), 2006, С. 205.

19.Gorbacheva L., Storozhevykh T., Pinelis V., Ishiwata S., Strukova S. Proteinase activated receptors impact to hippocampal neurons survival.// Abstracts of the 4th International Symposium "Neuroprotection and Neurorepair. Focus 2006: Cerebral Ischemia and Stroke", Magdeburg (May3-6), 2006, Р. 50.

20.Горбачева Л.Р., Сторожевых Т.П., Пинелис В.Г., Струкова С.М. Участие сериновых протеиназ системы свёртывания крови - тромбина и фактора Ха в регуляции кальциевого сигнала гиппокампальных нейронов.// Матер. XIV Междунар. конф. "Новые информ. технологии в медицине, биологии, фармакологии и экологии", Гурзуф, 2006, С. 86-88.

21.Горбачева Л.Р., Сторожевых Т.П., Пинелис В.Г., Струкова С.М. Рецепторы, активируемые протеиназами, защищают гиппокампальные нейроны от глутаматной цитотоксичности.// Матер. конф. «Нейроспецифические метаболиты и энзимологические основы деятельности ЦНС», Пенза (25 – 27 сентября), 2006, С. 43-44.

22.Rusanova A., Makarova A., Gorbacheva L., Vasileva T., Markvicheva E.,

Grandfils Ch., Bespalova Z., Umarova B., Strukova S. Thrombin receptor agonist peptide as a novel antiulcerogenic factor.// In: «New Aspects of Biotechnology and Medicine» Eds: A M. Egorov and GE. Zaikov. NY: Nova Biomedical Books, 2007, Chapter 11, Р. 142-147.

23.Strukova S., Gorbacheva L.R., Storozhevykh T.P., Pinelis V.G. Neuroprotective properties of agonists of protease activated receptors.// In: «New Aspects of Biotechnology and Medicine» Eds: A M. Egorov and GE. Zaikov. NY: Nova Biomedical Books, 2007, Chapter 13, Р.121-125.

24.Струкова С.М., Горбачева Л.Р., Сторожевых Т.П., Макарова А.М., Ишивата С. Нейропротекторные и противовоспалительные свойства агонистов рецепторов, активируемых протеиназами.// Матер. III-ей Всеросс. науч. конф. «Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии»( с международным участием), Москва(1-3 февраля), 2007, С. 231.

25.Макарова А.М., Горбачева Л.Р., Русанова А.В., Струкова С.М. Роль рецептора PAR1 тучных клеток в противовоспалительном действии активированного протеина С.// Матер. III-ей Всеросс. науч. конф. «Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии»(с международным участием), Москва(1-3 февраля), 2007, С. 132-133.

26.Русанова А.В., Макарова А.М., Горбачева Л.Р., Марквичева Е.А., Струкова С.М. Протекторное действие инкапсулированного пептида-агониста рецептора тромбина(PAR1) в модели язвы желудка крыс.// Матер. III-ей Всеросс. науч. конф. «Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии» (с международным участием), Москва(1-3 февраля), 2007, С. 209-210.

27.Горбачева Л.Р., Сторожевых Т.П., Пинелис В.Г., Струкова С.М. Активированный протеин С защищает нейроны мозга от глутаматной эксайтотоксичности.// Матер. III-ей Всеросс. науч. конф. «Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии»(с международным участием), Москва(1-3 февраля), 2007, С. 57-58.

28.Струкова С.М., Горбачева Л.Р., Макарова А.М., Сторожевых Т.П., Пинелис В.Г., Ишивата С. Нейропротекторные и противовоспалительные функции агонистов рецепторов, активируемых протеиназами.// Матер. IV-го симпозиума «Химия протеолитических ферментов», Москва (23-25 апреля), 2007, С. 46.

29.Горбачева Л.Р., Сторожевых Т.П., Пинелис В.Г., Струкова С.М. Активированный протеин С защищает гиппокампальные нейроны от гибели через рецепторы 1-го типа, активируемые протеиназами.// Матер. IV-го симпозиума «Химия протеолитических ферментов», Москва (23-25 апреля), 2007, С. 47.

30.Макарова А.М., Горбачева Л.Р., Замолодчикова Т.С., Румш Л.Д., Струкова С.М. Разнонаправленное действие сериновых протеиназ – активированного протеина С и дуаденазы на тучные клетки.// Матер. IV-го симпозиума «Химия протеолитических ферментов», Москва (23-25 апреля), 2007, С. 129.

31.Gorbacheva L., Storozhevykh T., Pinelis V., Strukova S. Neuroprotective effects of serine proteinases: thrombin, Factor Xa and activated protein C.// Abstracts of the 3rd Intern Congress ”Neuroscience for Medicine and Psychology” (Sudak, Crimea, Ukraine, June 12-20, 2007), 2007, Р. 84-85.

32.Makarova A.M., Gorbacheva L.R., Zamolodchikova T.S., Rumsh L.D., Smirnov M., Strukova S.M. The role of PAR1 in the protective action of activated protein C in the non-immune mast cell activation.// Biomed Khim., 2007, 53(4), Р. 412-26.

33.Strukova S.M., Gorbacheva L.R., Storojevykh T.P., Pinelis V.G. Anti-apoptotic effects of serine proteinases of hemostasis at glutamate-induced neurotoxicity.// Abs XXIst Congress of ISTH, Geneva (July 6–12), 2007, Abs P-M- 070.

34.Makarova A., Gorbacheva L., Zamolodchikova T., Rumsh L., Smirnov M., Strukova S. Direct protective effect of activated protein C on mast cells degranulation.// Abstracts of the XXIst Congress of ISTH. Geneva (July 6–12), 2007, Abs P-M-080.

35.Румш Л.Д., Лихарева В.В., Михайлова А.Г., Горбачева Л.Р., Струкова С.М. Пути реализации уникальной специфичности энтеропептидаы. Физиологическая роль энтеропептидазы.// Матер. Междунар. конф. «Протеолиз, механизмы его регуляции и роль в физиологии и патологии клетки», Минск (25-26 октября), 2007

36.Gorbacheva L.R., Storozhevykh T.P., Pinelis V.G., Strukova S. Protease-activated receptor (PAR)1-mediated anti-apoptotic effect of activated protein C on glutamate excitotoxicity in hippocampal neurons.// Thromb Haemost, 2007, 98(5), Р. 1150-1152.

37.Rumsh L.D., Likhareva V.V., Mikhailova A. G, Gorbacheva L.R., Strukova S.M. Ways of realization of high specifcity and effciency of enteropeptidase. Physiological role of enteropeptidase.// PNAS (Belarus), Ser Med Sci, 2008, N 1, Р. 31—37.

38.Горбачева Л.Р., Сторожевых Т.П., Пинелис В.Г., Струкова С.М. Активированный протеин С через рецептор PAR1 регулирует выживаемость нейронов при глутаматной эксайтотоксичности.// Биохимия, 2008, 73(6), С. 893 – 902.

39.Gorbacheva L., Strukova S., Pinelis V., Ishiwata Sh. and Reiser G. Activated protein C protects hippocampal neurons from thrombin-induced toxicity// Abstracts of the 5th International Symposium "Neuroprotection and Neurorepair. Focus 2008: Cerebral Ischemia and Stroke", Magdeburg, Germany, May 17-20, 2008, P.20.

40.Gorbacheva L., Storozhevykh T., Pinelis V., Strukova S. and Reiser G. Activated protein C can protect the rat cortical and hippocampal neurons from glutamate-induced death // J Thromb Haemost., 2008, 6, Suppl. 1, P.26.