Научная тема: «РЕГУЛЯЦИЯ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ КЛЕТОК ТРАНСГЕННЫМИ НЕЙРОТРОФИЧЕСКИМИ ФАКТОРАМИ»
Специальность: 03.00.25
Год: 2009
Отрасль науки: Биологические науки
Основные научные положения, сформулированные автором на основании проведенных исследований:

1. Нейроэктодерма трансгенных эмбрионов дрозофилы, продуцирующая нейротрофические факторы, способна стимулировать дифференцировку клеток млекопитающих нейрального происхождения при их совместном культивировании.

2. Смешанная ксенотрансплантация эмбриональных клеток крысы и  нервных тканей трансгенных линий дрозофилы с геном gdnf под контролем  промотора гена  hsp70 дрозофилы стимулирует дифференцировку клеток крысы в нейральном направлении трансплантируемых клеток на границе трансплантат – мозг реципиента.

3. Ксенотрансплантанты с трансгенными, эмбриональными, нервными тканями дрозофилы, экспрессирующими нейротрофические факторы человека,  блокируют  образование глиального рубца на границе трансплантат – ткани мозга реципиента.

4. Обнаружена позитивная роль белков теплового шока HSP70 в снижении образования глиального рубца при трансплантациях.

5. Обнаружено, что трансдуцированный промотор гена белка теплового шока дрозофилы hsp70 активизируется в клетках млекопитающих при температуре 39оС, при этом появление продукта  наблюдается лишь через сутки.

6. Обнаружено, что трансгенные по gdnf клетки человека линии  НЕК293, существенно снижают образование рубцовой ткани при их трансплантации в мозг крыс.

7. Обнаружена возможность стимулировать рост отростков у эмбриональных спинальных ганглиев и у поврежденной нервной ткани (фрагмент зачатка спинного мозга эмбриона человека) млекопитающих посредством совместного культивирования его с трансгенным клетками, экспрессирующими gdnf .

Список опубликованных работ
Публикации

1. Корочкин Л.И.,Сергеев П.В., Башкиров B.Н., Панин В.М., Габитова Л.Б., Мартинс К., Копанцева М.Р., Шостак Н.Г., Павлова Г.В., Барский В.Е., и др. Тканеспецифическая экспрессия гена estS у трансгенных дрозофил. ДАН (1995), т.340, с. 433-436.

2. Александрова М.А., Павлова Г.В., Ревищин А.В., Башкиров В.Н., Модестова Е.А., Евгеньев М.Б., Сабурина И.И., Мерцалов И.Б., Венгрова С.П., Корочкин Л.И. Влияние чужеродного гена GDNF на развитие трансплантата и ксенотрансплантата в мозге крыс. Генетика (2000), т.36, с.1553-1560.

3. Павлова Г.В., Модестова Е.А., Венгрова С.Н., Ефанова А.А., Рыбцова Н.Н., Корочкин Л.И. Экспрессия человеческого гена gdnf в трансгенной линии Drosophila melanogaster. ДАН (2001), т. 376, с.694-696.

4. Корочкин Л.И., Александрова M.А., Ревищин А.В., Павлова Г.В., Башкиров В.Н., Алексенко О.А., Евгеньев М.Б. Эффект белка теплового шока HSP70 на формирование глиального рубца при нейротрансплантации. ДАН (2001), т.383, №3, с.113-5.

5. Корочкин Л.И., Александрова M.А., Павлова Г.В., Башкиров В.Н., Ревищин А.В., Алексенко О.А., Евгеньев М.Б. Влияние семейства HSP70 белков при алло- и ксенотрансплантации в мозг крысы. Цитология (2001), т.40, с. 803-806.

6. Павлова Г.В., Ефанов А.А., Башкиров В.Н., Модестова Е.А., Мерцалов И.В., Корочкин Л.И. Экспрессия генов ngf и bdnf человека в трансгенных линиях Drosophila melanogaster. Цитология (2002); №44 (11), с.1104-8.

7. Корочкин Л.И., Александрова М.А., Башкиров В.Н., Трухачева А.А., Дзитоева С.Г., Павлова Г.В., Муркин Е.А., Евгеньев М.Б., Ревищин А.В., Модестова Е.А. Ксенотрансплантация эмбриональной нервной ткани нейромутанта Drosophila стимулирует развитие трансплантата в мозгу крысы в нейральном направлении и блокирует образование глиального рубца. Цитология (2002); №44 (12), с.1181-5

8. Pavlova G., Enblom A., Revishchin A., Sandelin M., Korochkin L., Kozlova E. The influence of donor Drosophila cells on survival of peripherally grafted embryonic or fetal rat dorsal root ganglia. Cell Transplantation (2003), V 12, p 705-715.

9. Павлова Г.В., Мануилова Е.С., Арсеньева Е.А., Гривенников И.А., Муркин Е.В., Канайкина Н.В., Ревищин А.В., В.Н.Тарантул, Корочкин Л.И. Регуляция экспрессии белка BFP в эмбриональных клетках. Бюлл. Эксперим. Медицины. 2005, Т. 139. № 4. с. 514-516

10. Маркитанова Ю.В., Макарьев Е.О., Павлова Г.В., Зиновьева Р.Д., Миташев В.И. Локализация экспрессии гена Prox1 при регенерации хрусталика и сетчатки у тритонов. ДАН (2003); №391, с.361-4.

11.Павлова Г.В., Ревищин А.В.,Мирошникова О.А.,Муркин Е.В.,Харлампиева Д.Д., Рыбалкина Е.Ю., Корочкин Л.И. Влияние чужеродного гена gdnf в ксенотрансплантатах на посттравматические процессы в мозге мышей. Молекулярная медицина (2006), №2, с. 44-48.

12. Андреева Л.Е., Хайдарова Н.В., Родригес-Бланко А.В., Канайкина Н.Н., Ревищин А.В., Тарантул В.З., Корочкин Л.И., Павлова Г.В. Экспрессия репортерных генов под контролем регуляторных элементов гена теплового шока дрозофилы в трансгенных эмбрионах вьюна Misgurnus fossilis L. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия (2006), Т. 4 (6), с.39-44.

13.Охоботов Д.А.,Зарайский Е.И.,Павлова Г.В.,Камалов А.А.Иммунологические факторы бесплодия и антигены сперматозоидов. Медицинские науки. (2007), №4, стр. 31-42.

14. Поляков А.С., Корочкин Л.И., Павлова Г.В. Исследование экспрессии и анализ функции гена Sip1 в развитии коры головного мозга. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия, (2007), Т. 2, №2, с. 40-44.

15. Бутовская П.Р.,Мартиросян И.А.,Баранов В.С,Егорова А.А,Киселев А.В.,Павлова Г.В.,Корочкин Л.И. Выявление соматического мозаицизма у человека с помощью полимеразной цепной реакции со случайными праймерами. Генетика (2007),Т. 43, №12, с. 1694–1699.

16. Павлова Г.В.,Охотин В.Е., Корочкин Л.И., Ревищин А.В. Геномная регуляция судьбы нейральных стволовых клеток млекопитающих. Генетика (2008), Т. 44, № 3, с. 293-299.

17. Revishchin A.V.,Korochkin L.I.,Okhotin V.E., and Pavlova G.V. Neural Stem Cells in the Mammalian Brain. International Review of Cytology, (2008), V. 265, p. 161-175.

18. Koles K.,Repnikova E.,Pavlova G.,Korochkin L.I.,Panin V.M. Sialylation in protostomes: a perspective from Drosophila genetics and biochemistry. Glycoconj J.(2008) Epub ahead of print.

19. E.Savvateeva-Popova, A.Popov., A.Grossman, E.Nikitina, A.Medvedeva, D.Molotko, N.Kamyshev, K.Pyatkov,O.Zatsepina, N.Schostak, E.Zelentsova,G.Pavlova,D.Panteleev, P.Riederer and M.Evgen`ev. Non-coding RNA as a trigger of neuropathologic disorder phenotypes in transgenic Drosophila. J. of Neural Transmission, (2008), Epub ahead of print.

20. Корочкин Л.И., Павлова Г.В., Зарайский Е.И., Ревищин А.В., Полтавцева Р.А., Рыбалкина Е.Ю., Эрнст Л.К. (2007) Способ предифференцировки стромальных стволовых клеток костного мозга в тирозингидроксилаза-позитивные клетки. Заявка на патент №2007113908. 13.04.2007.

21. Павлова Г.В., Зарайский Е.И., Ревищин А.В., Рыбалкина Е.Ю., Корочкин Л.И. (2007) Способ стимуляции регенерации нервной ткани млекопитающих. Заявка на патент №200701108. 20.06.2007

22.Павлова Г.В., Зарайский Е.И., Ревищин А.В., Рыбалкина Е.Ю., Корочкин Л.И. (2007) Способ предупреждения образования глиального рубца. Заявка на патент №200701109. 20.06.2007

23. Павлова Г.В., Зарайский Е.И., Ревищин А.В., Рыбалкина Е.Ю., Корочкин Л.И. (2007) Способ активации регенерации нервной ткани млекопитающих. Заявка на патент №200701110. 20.06.2007

24. Павлова Г.В., Зарайский Е.И., Ревищин А.В., Рыбалкина Е.Ю., Корочкин Л.И. (2007) Способ стимуляции регенерации нервной ткани. Заявка на патент №200701112. 20.06.2007

25. Павлова Г.В., Зарайский Е.И., Ревищин А.В., Рыбалкина Е.Ю., Корочкин Л.И. (2007) Способ ускорения регенерации нервной ткани. Заяв. на патент №200701111. 20.06.2007

Главы в книгах

26. Korochkin LI., Alexandrova A, Pavlova G.et.al. Genetic Engineering Methods of the Regulation of Stem Cells Differentiation. Biotechnology and Medicine, Nova Science Publishers (2004), p.121-136.

27.Korochkin L.I., Alexandrova A, Pavlova G.,et.al. Protein Hsp70 Blocks The Glial Scar Formation Around The Neurotransplant. Biotechnology and Medicine, Nova Science Publishers (2004), p. 137-141.

28. Shegelskaya E.A., Mikulinskii Y.E., Revishchin A.V., Pavlova G.V. and Korochkin L.I. Differentiation of Stem Cells in the Culture. In book: Genes, Gene Families, and Isozymes. Medimond, Berlin (2003), p.69-73.

Тезисы конференций:

29. Korochkin L., Alexandrova M., Bashkirov V., Dzitoeva S., Pavlova G., Trukhatcheva A., Evgenev M., Modestova A., Xenotransplantation of Drosophila nerve cells into mammalian brain: molecular genetic and embryological aspects. International Symposium on X-chromosome inactivation in mammals. Novosibirsk, 1999, p. 29.

30. Korochkin L., Alexandrova M., Bashkirov V., Dzytoeva S., Pavlova G., Trukhatcheva A., Evgeniev M., Grossman A. Xenotransplantation of Drosophila nerve cells into mammalian brain: molecular genetical and clinical aspects. 16th European Drosophila Research Conference. Zurich, 1999, p.76.

31. Korochkin L., Alexandrova M., Bashkirov V., Dzytoeva S., Pavlova G., Trukhatcheva A., Evgeniev M., Grossman A. Embryonic nerve cells from Drosophila melanogaster stimulate development of neural homografts in rat brain and blocked of glial scar formation. 41th Annual Drosophila Research Conference. Pittsburgh, 2000, р.704a.

32. Korochkin L.,Alexandrova M., Bashkirov V.,Dsitoeva S.,Pavlova G.,Trukhatcheva A, Evgeniev M. Xenotransplantation of Drosophila embryonic nerve cells into mammalian brain: molecular genetic and clinical aspects. 6thEast European Conference of the International Society of Invertebrate Neurobiology. Moscow-Puschino, 2000, р.68-69.

33. Korochkin L., Alexandrova M., Bashkirov V., Pavlova G., Trukhatchava A., Evgeniev M., Modestova E. Grosman A. Xenotransplantation of Drosophila embryonic cells into mammalian brain. Proc. of 2nd Internat. Conference on bioinformatics of genome regulation and structure. V.3, BGRS, Novosibirsk, 2000, р.2728-2729.

34. Корочкин Л.И., Александрова М.А., Башкиров В.Н., Дзитоева С.Г., Павлова Г.В., Трухачева А.П., Евгеньев М.Б. Ксенотрансплантации нервных клеток Drosophila melanogaster в мозг млекопитающих: Молекулярно-генетические и эмбриологические аспекты. Онтогенез, 2000, Т.31, №4, с. 293-294.

35.Pavlova G., Revischin, Miroschnikova O., Titova E., Murkin E., Enblom A., Sandelin M., Kozlova E., Korochkin L. The influence of donor age, nerve growth factor and cografting with Drosophila cells on survival of peripherically grafted embryonic or fetal rat dorsal root ganglia. Progress in biotechnology and neurobiology – Integrative medicine.Egypt,Hurgada,2004, p.121.

36. Pavlova G., Titova E., Bragina T., Mirochnikova O., Murkin E., Grivennikov I., Manuilova E., Narantul V., Revishchin A., Korochkin L.. Activation of foreign protein synthesis in stem cells. ELSO. Nice. 2004, p.178-181.

37.Mirochnikova O., Pavlova G., Murkin E., Titova E., Bragina T., Korochkin L. The synthesis of genetical constructs to transform the humam stem cells. Progress in biotechnology and neurobiology – Integrative medicine. Egypt, Hurgada, 2004, p.111.

38.Павлова Г.В., Мануилова Е.С., Гривенников И.А., Мирошникова О.А., Титова Е.А., Брагина Т.В., Муркин Е.В., Модестова Е.А., Корочкин Л.И. Активация синтеза чужеродного белка в культуре клеток. Прогресс в биотехнологии и нейробиологии – интегративная медицина. Украина, Судак, июнь 2004 г., с.34

39. Титова Е.А., Павлова Г.В., Мирошникова О.А., Брагина Т.В., Муркин Е.В., Модестова Е.А., Корочкин Л.И. Селекция линии дрозофилы, несущей ген красного белка. Прогресс в биотехнологии и нейробиологии–интегративная медицина. Украина, Судак, 2004 г., с.48.

40.Korochkin L.I.,Grivennikov I.A.,Manuilova E.S.,Tarantul V.N.,Revishchin A.V.,Titova E.V., Miroshnikova O.A., Bragina T.V., Murkin E.V., Kanaikina N.V., Pavlova G.V. Transformation stem cells culture by genes of human neurotrophic. J.of Biotechnology (2005), V.1, p.64.

41.Титова Е.А., Павлова Г.В., Мирошникова О.А., Муркин Е.В., Канайкина Н.Н., Ревищин А.В., Корочкин Л.И. Экспрессия чужеродных человеческих NGF и GDNF в трансгенных линиях Drosophila. В кн: Системная биология и биоинженерия. М., Макс Пресс, 2005, с. 78.

42.Титова Е.А.,Брагина О.В.,Мирошникова О.А.,Корочкин Л.И.,Павлова Г.В. Создание модельных генетических систем для изучения нейротрофических факторов и флуоресцентных белков. В кн:Системная биология и биоинженерия. М.,Макс Пресс,2005, с. 81.

43.Харлампиева Д.Д., Павлова Г.В., Ревищин А.В., Рыбалкина Е.В., Корочкин Л.И. Влияние трансгенного нейротрофического фактора GDNF на дифференцировку стволовых клеток и посттравматические процессы в мозге млекопитающих. В кн: Системная биология и биоинженерия. М., Макс Пресс, 2005, с.82.

44.Павлова Г.В.,Корочкин Л.И.Новые подходы к регуляции дифференцировки стволовых клеток. В кн:Системная биология и биоинженерия. М.,Макс Пресс,2005,с.100-101.

45. Харлампиева Д.Д., Павлова Г.В., Мирошникова О.А., Ревищин А.В., Рыбалкина Е.В., Корочкин Л.И. Влияние трансфекции нейротрофического фактора GDNF на диффе-ренцировку стволовых клеток и посттравматические процессы в мозге млекопитающих. В кн: Системная биология и биоинженерия. М., Макс Пресс, 2005, с. 123-124.

46.Корочкин Л.И., Гривенников И.А.,Мануилова Е.С., Тарантул В.З., Ревищин А.В., Титова Е.В., Муркин Е.В., Канайкина Н.А., Павлова Г.В. Трансформация стволовых клеток генами нейротрофических факторов В кн. Биотехн.: Состояние и перспективы развития. 2005. с. 64-66.

47. Муркин Е.В., Павлова Г.В., Титова Е.В., Гривенников И.А., Мануилова Е.С., Ревищин А.В., Тарантул В.С., Корочкин Л.И. Активация чужеродных белков в стволовых клетках. В кн: Системная биология и биоинженерия. М., Макс Пресс, 2005, с.149-150.

48. Павлова Г.В., Ревищин А.В., Зарайский Е.И., Титова Е.В., Рыбалкина Е.А., Брагина Т.А., Мирошникова О.В., Муркин Е.В., Пономарь С.Н., Канайкина Н.А., Корочкин Л.И. Индукция специфической дифференцировки в региональных стволовых клетках человека. Научные Труды 1-го съезда физиологов СНГ. Т.2, Сочи-Дагомыс, 2005, с. 126.

49. Титова Е.А., Павлова Г.В., Мирошникова О.А., Харлампиева Д.В., Брагина Т.В., Муркин Е.В., Канайкина Н.Н., Антонова Г.А.,Ревищин А.В., Корочкин Л.И. Экспрессия чужеродных (человеческих) и нейротрофических генов NGF и GDNF в трансгенных линиях Drosophila. Материалы 6-ой Междунар. конф. Молекулярная генетика соматических клеток, 2005, .81

50.Титова Е.А., Брагина Т.В., Мирошникова О.А., Корочкин Л.И., Павлова Г.В., Создание модельных генетических систем для изучения нейротрофических факторов и флуоресцентных белков. Материалы 6-ой Международной конференции Молекулярная генетика соматических клеток, 2005, с.81-82.

51.Харлампиева Д.В., Павлова Г.В., Мирошникова О.А., Ревищин А.В., Рыбалкина Е.В., Корочкин Л.И. Влияние трансгенного нейротрофического фактора GDNF на дифференцировку стволовых клеток и посттравматические процессы в мозге млекопитающих. Материалы 6-ой Международной конференции Молекулярная генетика соматических клеток, 2005, с.82-83.

52.Канайкина Н.Н., Павлова Г.В., Титова Е.А., Мирошникова О.А., Антонова Г.А., Харлампиева Д.В., Муркин Е.В., Гривенников И.А., Мануилова Е.С., Арсеньева Е.Л. Ревищин А.В.,Тарантул В.З., Корочкин Л.И. Активация чужеродных белков в стволовых клетках. Материалы 6-ой Международной конференции Молекулярная генетика соматических клеток, 2005, с.95

53. Павлова Г.В., Корочкин Л.И. Новые подходы к регуляции дифференцировки стволовых клеток. Материалы 6-ой Международной конференции Молекулярная генетика соматических клеток, 2005, с.100 -101

54. Павлова Г.В., Ревищин А.В., Корочкин Л.И. Разработка и испытание методов подготовки аутологичного материала для клеточной терапии при нейродегенеративных заболеваниях. 1-ая всерос. школа-конференция. Аутологичные стволовые и прогениторные клетки. 2008, с. 20.

55.Лопатина Т.В., Калинина Н.И., Ревищин А.В., Павлова Г.В., Парфенова Е.В., Ткачук В.А. Деметилирование ДНК значительно усиливает индукцию нейральной дифференцировки стромальных клеток жировой ткани, вызванную нейротрофическим фактором BDNF и ретиноевой кислотой. 1-ая всероссийская школа-конференция: Аутологичные стволовые и прогениторные клетки. 2008, с. 44.

56. Тимошенко Т.В., Полетаева И.И., Перепелкина О.В., Сазонова А.С., Павлова Г.В., Ревищин А.В. Управление уровнем пролиферации клеток переднего мозга с помощью нейропептида семакс и ингибитора NO-синтазы. Первая всероссийская школа-конференция: Аутологичные стволовые и прогениторные клетки. 2008, с. 55.