Научная тема: «РОЛЬ САЙТ-СПЕЦИФИЧЕСКОГО АЦЕТИЛИРОВАНИЯ И МЕТИЛИРОВАНИЯ В РЕГУЛЯЦИИ ОНКОСУПРЕССОРА Р53 У ЧЕЛОВЕКА»
Специальность: 03.00.25
Год: 2009
Отрасль науки: Биологические науки
Основные научные положения, сформулированные автором на основании проведенных исследований:

 

1. рЗ00/СВР-зависимое ацетилирование р53 приводит не только к стабилизации последнего, но и к усилению взаимодействия между этими белками за счет возникновения нового контакта между ацетилированными лизинами р53 и бромодоменами рЗ00/СВР.

2. В ответ на генотоксический стресс р53 претерпевает новую ковалентную пост-трансляционную модификацию - метилирование по лизину КЗ72, которое осуществляется ферментом лизин-специфической метилтрансферазой Set7/9.

3. К372-специфическое метилирование ведет к стабилизации белка р53 в ответ на обработку клеток остеосаркомы доксорубицином и вызывает остановку клеточного цикла и апоптоз.

4. Стабилизация и активация белка р53 за счет К372-специфического метилирования происходит в результате усиления другой модификации, ацетилирования, которая появляется после метилирования.

5. В ответ на повреждения клеточной ДНК, вызывамые доксорубицином, в клетках остеосаркомы меняется экспрессия нескольких р53-зависимых миРНК. Кроме активации миРНК-34 происходит активация миРНК-26 и репрессия миРНК-16-2.

6. Одновременное повышение уровня миРНК-26a и понижение миРНК-16-2 в зависимости от р53 приводит к усилению апоптоза раковых клеток.

7. На основе полученных данных нами выдвигается следующая модель участия миРНК в р53-зависимом ответе: поскольку миРНК-16-2 опосредует временную остановку клеточного цикла в G1 фазе, который защищает раковые клетки от гибели, давая им возможность осуществить репарацию поврежденной ДНК, то за счет р53-зависимого подавления экспрессии миРНК-16-2, поврежденные клетки не успевают провести репарацию и умирают в результате митотической катастрофы.

Список опубликованных работ
1. Barlev, N.A. and Borchsenius, S.N. 1991. Continuous distribution of Mycoplasma genome sizes. Biomed. Sci. 2: 641-645.

2. Nikonov, A.V., Barlev, N.A., and Borchsenius, S.N. 1992. Molecular biological differences between strains of mycoplasma gallisepticum. Цитология 34: 107-112.

3. Barlev, N.A*., Chen, Y.*, Westergaard, O., and Jakobsen, B.K. 1993. Identification of the C-terminal activator domain in yeast heat shock factor: independent control of transient and sustained transcriptional activity. EMBO J. 12: 5007-5018.(*co-first authors).

5. Barlev, N.A., Candau, R., Wang, L., Darpino, P., Silverman, N., and Berger, S.L. 1995. Characterization of physical interactions of the putative transcriptional adaptor, ADA2, with acidic activation domains and TATA-binding protein. J. Biol. Chem. 270: 19337-19344.

6. Candau, R., Moore, P., Wang, L., Barlev, N.A., Ying, C, and Berger, S.L. 1996. Identification of functionally conserved human homologues of the yeast adaptors ADA2 and GCN5. Mol Cell Biol 16: 593-602.

7. Wang, L., Mizzen, C, Ying, C, Candau, R., Barlev, N., Brownell, J., Allis, С D., and Berger, S.L. 1997. Histone acetyltransferase activity is conserved between yeast and human GCN5, and is required for complementation of growth and transcriptional activation. Mol Cell Biol Г7: 519-527.

8. Barlev, N.A., Poltoratsky, V., Owen-Hughes, Т., Ying, C, Liu, L., Workman, J., and Berger, S.L. 1998. Regulation of GCN5 histone acetyltransferase activity via bromodomain-mediated binding and phosphorylation by the Ku/DNA-PK complex. Mol Cell Biol 18: 1349-1358.

9. Jensen, D. E., Proctor, M., Marquis, S. Т., Gardner, H. P., Ha, S. I., Chodosh, L. A., Ishov, A. M., Tommerup, N., Vissing, H., Sekido, Y., Minna, J., Borodovsky, A., Schultz, D. C, Wilkinson, K.D., Maul, G.G., Barlev, N., Berger, S. L., Prendergast, G. C, and Rauscher, F. J. 3rd. (1998) "BAP1: a novel ubiquitin hydrolase which binds to the BRCA1 RING finger and enhances BRCA1-mediated cell growth suppression", Oncogene 16, pp. 1097-112.

10. Barlev, N. A., Workmann, J. L., and Berger S. L. and (1999) "Regulation of GCN5 histone acetyltransferase (HAT) activity by phosphorylation mediated by DNA-dependent protein kinase", Methods Enzynwl, 304, pp.696-715.

11. Anafi, M., Yang ,Y. F., Barlev, N. A., Govindan, M. V., Berger, S. L., Butt, T. R., and Walfish, P. G.(2000) "GCN5 and ADA adaptor proteins regulate triiodothyronine/GRIPl and SRC-1 coactivator-dependent gene activation by the human thyroid hormone receptor", Mol. Endocrinol., 14, pp.718-32.

12. Yan, Y., Barlev, N. A., Haley, R. H, Berger, S. L , and Marmorstein, R. (2000) "Crystal structure of yeast esal suggests a unified mechanism for catalysis and substrate binding by histone acetyltransferases", Mol. Cell, 6, pp. 1195-205.

13. Barlev, N. A., Liu, L., Chehab, N. H., Mansfield, K., Halazonteis, T. D., and Berger, S. L. (2001) "Acetylation of p53 activates transcription through recruitment of coactivators/hi stone acetyltransf erases", Mol. Cell,_&, pp. 1243-1254.

14. Goo Y.H., Sohn Y.C., Kim D.H., Kim S.W., Kang M.J., Jung D.J., Kwak E., Barlev N.A., Berger S.L., Chow V.T., Roeder R.G, Azorsa D.O., Meltzer P.S., Suh P.G, Song E.J., Lee K.J., Lee Y.C., Lee J.W. (2003)"Activating Signal Cointegrator 2 Belongs to a Novel Steady-State Complex That Contains a Subset of Trithorax Group Proteins" Mol Cell Biol, 23, pp. 140-149.

15. Barlev, N. A., Emelyanov, A., Castagnino, P., Bannister, A., Birshtein, В., Kouzarides, Т., and Berger, S. L. (2003) "Identification of a new homologue of yeast putative adaptor ADA2 in humans: novel mechanism of transcriptional co-activation" Mol. Cell. Biol, 23_, pp. 6944-57.

16. Chuikov S., Kurash J.K., Wilson J.R., Xiao В., Justin N., Ivanov G.S., McKinney K., Tempst P., Prives C, Gamblin S.J., Barlev N.A.*, and Danny Reinberg (2004) "Regulation of p53 activity through lysine methylation" Nature 432, pp.353-60. * co-corresponding author.

17. Morgunkova A., and Barlev N.A. (2006) "Lysine methylation goes global" Cell Cycle 5:pp. 1308-12.

18. Ivanov, G, Ivanova, Т., Kurash J.K, A. Ivanov, S. Chuikov, D. Proja, С Kuperwasser, F. Rauscher, D. Reinberg, and N. A. Barlev (2007) " DNA damage activates p53 through a methylation-acetylation cascade" Mol. Cell Biol, 27, pp. 6756-69.

19. A. G. Mittenberg, T.N. Moiseeva, and N. A. Barlev (2008) "Role of proteasomes in transcription and their regulation by covalent modifications" Frontiers in Biosciences 13, pp.7184-92

20. Barlev N., Sayan В., Candi E., Okorokov A. "The MicroRNA and p53 families join forces against cancer" (2009) Cell Death&Differentiation, в печати.

21. Моисеева Т.Н., Миттенберг А.Г., Барлев Н.А. (2009). «Влияние протеасом на транскрипцию и их регуляция посттрансляционными модификациями». Цитология. 51(0):000-000. В печати.