Научная тема: «КЛЕТОЧНЫЕ МЕХАНИЗМЫ РЕГЕНЕРАТИВНОГО ПОТЕНЦИАЛА МЕЗЕНХИМНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, РОЛЬ СЕМЕЙСТВА ПРОДУКТА ГЕНА РЕТИНОБЛАСТОМЫ»
Специальность: 03.03.04
Год: 2014
Отрасль науки: Биологические науки
Основные научные положения, сформулированные автором на основании проведенных исследований:
  1. МСК сердца, мочевого пузыря и костного мозга мышей сходны по мезенхимным, но отличаются тканеспецифическими маркерами, клоногенностью, скоростью пролиферации, уровнем спонтанной и индуцированной жировой и костной дифференцировок. МСК мочевого пузыря EA плодов экспрессируют некоторые маркеры уротелия, уровень продукции которых возрастает после обработки клеток деметилирующим препаратом 5-азацитидином. Различия в функциональных фенотипах МСК сердца и мочевого пузыря мышей свидетельствуют об их тканевом импринтинге.
  2. В ходе длительного культивирования МСК мышей повышается скорость их пролиферации, снижается способность к ЖД и адгезивность на фоне изменений кариотипа; на 43- 47-м пассажах МСК образуют опухоли при подкожном или внутримышечном переносе сингенным животным. Приобретение туморогенности МСК сочетается с неиндуцированным повышением уровней ядерного β-катенина, транскрипционных факторов Tcf3,4, киназы Gsk3β и снижением чувствительности к ингибиторам Gsk3β, которые в нормальных условиях индуцируют в МСК сигнальный путь Wnt/β-катенин.
  3. При кокультивировании с клетками линии А-549 эпителиального происхождения в условиях разделения клеточно непроницаемой мембраной в МСК индуцируется сигнальный путь Wnt/β-катенин и экспрессируются эпителиальные маркеры; торможение в клетках А-549 экспрессии гена WNT2 с помощью миРНК отменяет в кокультивируемых МСК индукцию сигнальной формы β-катенина, но не влияет на повышение его общеклеточного уровня, ослабляет, но не отменяет экспрессию эпителиальных маркеров.
  4. Репаративный эффект МСК, полученных от доноров-самцов GFP и трансплантированных сингенным самкам линии C57BL, зависит от специфики травматического повреждения органов- мишеней. Репарация после трансплантации МСК выявляется на низком уровне в лёгких и мочевом пузыре реципиентов по наличию клеток, содержащих Y-хромосому и экспрессирующих экзогенный Gfp и эпителиальные маркеры в течение 30 сут после трансплантации. Трансплантация МСК способствует выживанию и улучшению функции лёгких у мышей с ОЛП путём уменьшения продукции провоспалительных и усиления продукции противовоспалительных цитокинов.
  5. pRb с мутацией в функциональном Т-антигенсвязывающем домене (ΔS/N) сохраняет способность регулировать клеточный цикл и дифференцировку в МСК с помощью альтернативного E2f1 сигнального пути, опосредованного E2f4. Мутация ΔS/N, вероятно, имитирует природные мутации RB, характеризующиеся возникновением опухолей с низкой проявляемостью. В МСК с конститутивной экспрессией ΔS/N уровень индуцированной мышечной дифференцировки повышен в ущерб жировой, которая, наоборот, усиливается в клетках, экспрессирующих функциональные формы экзогенного pRb.
  6. Сигнальные пути pRb и Wnt/β-катенин взаимодействуют в МСК путём формирования комплексов р130/β-катенин, в которых выявляются E2f4, β-катенин, Gsk3β и Tcf3,4. Комплекс р130/β-катенин, включающий E2f4, выявляется в МСК во всех фазах клеточного цикла и, возможно, играет важную функциональную роль во взаимной регуляции генов, содержащих сайты связывания транскрипционных факторов Lef/Tcf и E2f.
Список опубликованных работ
Попов Б. В., Попов Н. Б., Френкель З. М. 1997. Получение гена ретинобластомы с мутацией в C-домене и оценка рост-супрессирующей активности его продукта. Молекулярная биология. 31 : 324–331.

Попов Б. В., Кулакова И. А., Попов Н. Б., Бондарь Т. О., Френкель З. М., Николаев А. В. 1998. Рисунок фосфорилирования продукта гена ретинобластомы в стабильных клеточных линиях человека и мыши. Онтогенез. 29 : 245–253.

Попов Н. Б., Френкель З. М., Бондарь Т. О., Попов Б. В. 1998. Конструирование, экспрессия и очистка продукта рекомбинантного гена ретинобластомы, включающего вектор глутатион-С-трансферазы. Вест. Ст-Петер. универ. 3 : 92–104.

Popov B., Chang L. S., Serikov V. 2005. Cell cycle-related transformation of the E2F4-p130 repressor complex. Biochem. Biophys. Res. Com. 336 : 762–769.

Serikov V., Popov B., Kropotov A., Tomilin N. 2005. BM-derived cells restore expression of peroxiredoxin V in the airways following acute naphthalene injury in mice. Cytotherapy. 7 : 483–493. EA

Рopov B. V., Serikov V. B., Petrov N. S., Izusova T. V., Gupта N., Matthay M. A. 2007. Lung epithelial cells A549 induce epithelial differentiation in mouse mesenchymal BM stem cells by paracrine mechanism. Tissue Engineering. 13 : 2445–2450.

Serikov V. B., Popov B. V., Mikhaylov V. M., Gupta N., Matthay M. A. 2007. Evidence of temporary airway epithelial repopulation and rare clonal formation by BM-derived cells following naphthalene injury in mice. Anatomical records. 290 : 1033–1046.

Gupta N., Su X., Popov B., Lee J. W., Serikov V., Matthay M. A. 2007. Intapulmonary delivery of bone marrow-derived mesenchymal stem cells improves survival and attenuates endotoxin-induced acute lung injury in mice. The Journal of Immunology. 179 : 1855–1863.

Гринчук Т. М., Иванцов К. М., Алексеенко Л. Л., Кожухарова И. В., Зайчик А. М., Михайлов В. М., Петров Н. С., Попов Б. В. 2008. Характеристика культуры мезенхимных стволовых клеток мыши, экспрессирующих GFP. Цитология. 50 : 1029–1034.

Попов Б. В., Петров Н. С., Михайлов В. М., Томилин А. Н., Алексеенко Л. Л., Гринчук Т. М., Зайчик А. М. 2009. Спонтанная трансформация и иммортализация мезенхимных стволовых клеток в культуре in vitro. Цитология. 51 (2) : 91–102.

Попов Б. В., Watt S. W., Розанов Ю. М., Chang L. S. 2010. Мутация в области структурного кармана pRb вызывает повышение его сродства к E2F4, сопряженное с активацией мышечной дифференцировки. Молекулярная биология. 44 : 323–334.

Попов Б. В. Введение в клеточную биологию стволовых клеток. Спецлит, СПб., 2010. 319 с. ISBN 978–5-289–00430–4.

Попов Б. В., Зайчик А. М., Будько М. Б., Пица Н. А., Комяков Б. К., Толкунова Е. Н., Жидкова О. В., Петров Н. С. 2010. Модель in vivo для изучения трансдифференцировки соматических клеток в уротелий. Цитология. 52 (10) : 844–852.

Михайлов В. М., Каминская Е. В., Попов Б. В., Кузоватов С. Н., Скрипкина Н. С., Косякова Г. П., Зайчик А. М., Гринчук Т. М., Никольский Н. Н. 2010. Характеристика опухолей, развившихся после введения мышам mdx культивируемых мезенхимальных стволовых клеток костного мозга мышей C57BL/6, экспрессирующих белок GFP. Цитология. 52 : 853–857.

Петров Н. С., Жидкова О. В., Зенин В. В., Розанов Ю. М., Попов Б. В. 2011. р130, β-катенин и Gsk3β формируют в мезенхимных стволовых клетках комплексы, включающие различные формы р130. Цитология. 53 : 106–114.

Попов Б. В., Зайчик А. М., Будько М. Б., Злобина О. В., Толкунова Е. Н., Жидкова О. В., Петров Н. С. 2011. Клетки эпителия кишечника трансдифференцируются в эпителий мочевого пузыря в опытах in vivo. Цитология. 53 : 332–339.

Petrov N., Zhidkova O., Serikov V., Zenin V., Popov B. 2012. Induction of Wnt/β-catenin signaling in mouse mesenchymal stem cells is associated with activation of the p130, E2f4 and formation of the p130/Gsk3β/β-catenin complex. Stem cells and Development. 21 : 589–597.

Жидкова О. В., Петров Н. С., Попов Б. В. 2013. Получение и характеристика маркерных и ростовых свойств мезенхимных стволовых клеток мочевого пузыря. Журнал эволюционной физиологии и биохимии. 49 (1) : 67–77.

Popov B. 2013. LGR5 expressing cells of hair follicle as potential targets for antibody mediated anti-cancer laser therapy. Proc. SPIE. 8699 : 26.