Научная тема: «КЛЕТОЧНЫЕ И МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ПРОТИВОВИРУСНОЙ ЗАЩИТЫ ПРИ КЛЕЩЕВОМ ЭНЦЕФАЛИТЕ»
Специальность: 14.03.09; 03.02.02
Год: 2014
Отрасль науки: Биологические науки
Основные научные положения, сформулированные автором на основании проведенных исследований:
  1. На ранней стадии инфекционного процесса у пациентов, невакцинированных и вакцинированных против КЭ, выявлены различия в  функциональной активности эффекторной фазы врожденного иммунитета: невысокая антигенная нагрузка и активации клеточных и гуморальных факторов врожденного иммунитета способствует быстрой элиминации вируса; высокий уровень антигенемии и отсутствие активации врожденного иммунитета являются предикторами длительной персистенции вируса.
  2. При манифестных формах КЭ в остром периоде заболевания умеренная активация клеточного, гуморального и цитокинового иммунного ответа у невакцинированных, а также вакцинированных против КЭ пациентов предопределяет развитие более легкого течения заболевания. Иммунопатогенетическими предикторами развития тяжелого течения КЭ являются: снижение содержания CD3+-, CD4+-Т-лимфоцитов, NK-клеток, иммуноглобулинов (IgG1, IgG3) и повышение количества В-лимфоцитов, увеличение концентраций цитокинов (IL-4, IL-10) и высокий уровень вирусспецифических IgM.
  3. Штаммы вируса КЭ, изолированные от больных с разными клиническими формами инфекции, в зависимости от молекулярно-генетической характеристики и биологических свойств разнонаправлено модулируют рецепторный аппарат иммунокомпетентных клеток и продукцию цитокинов. Высоковирулентный штамм ex vivo снижает экспрессию адгезивных (CD11b и ICAM-1) и активационных (CD69, CD25, CD95) молекул на клетках врожденного и адаптивного иммунитета и in vivo индуцирует высокий уровень  системного и локального цитокинового ответа (TNFα, IL-6, IFNγ). Слабовирулентные штаммы ex vivo усиливают экспрессию молекул адгезии и активации и  in vivo стимулируют  высокий уровень продукции IL-10.
  4. Биополимеры из морских гидробионтов - люромарин и тинростим с широким спектром биологического действия и иммуномодулирующими свойствами, проявляют in vitro и in vivo вирусингибирующую и протективную активность в отношении вируса КЭ. Экспериментально обоснована эффективность использования этих иммуномодуляторов в комплексной терапии КЭ.
Список опубликованных работ
1.Сравнительное изучение in vitro эффективности различных иммуномодулирующих препаратов при клещевом энцефалите / Крылова Н.В., Леонова Г.Н. // Вопросы вирусологии. - 2001. - № 1. – С. 25-28.

2. Изменение показателей иммунного статуса и их коррекция при разных формах клещевого энцефалита / Крылова Н.В., Якушева С.С., Борисевич В.Г., Леонова Г.Н. // Антибиотики и химиотерапия. – 2001. – Т. 46. - № 7. - С. 23-26.

3. Итоги изучения действия некоторых иммуномодуляторов интерферона и иммуностимуляторов при клещевом энцефалите / Леонова Г.Н., Крылова Н.В., Беседнова Н.Н. // Антибиотики и химиотерапия. – 2001. – Т. 46. - № 7. - С. 34-37.

4. Морфофункциональная характеристика макрофагов, зараженных вирусом клещевого энцефалита / Плехова Н.Г., Исачкова Л.М., Леонова Г.Н., Крылова Н.В. // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2001. - № 2. - С. 40-42.

5. Изучение эффективности различных иммунокорригирующих препаратов, применяемых для лечения клещевого энцефалита / Крылова Н.В., Леонова Г.Н. // В кн. «Клещевой энцефалит: к 65-летию открытия». – Владивосток. – 2002. С. 157-165.

6. Разработка методологического подхода для оценки специфической активности вакцин против клещевого энцефалита на примере вакцины Энцепур ® / Леонова Г.Н., Павленко Е.В., Майстровская О.С., Крылова Н.В., Ковальчук Н.В., Мизеров К.С., Д. Гниель // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. – 2004. – Т. 2. - № 15. – С. 30-36.

7. Клинико-иммунологическая эффективность вакцины «Энцепур» при вакцинации против клещевого энцефалита жителей Приморского края / Леонова Г.Н., Мизеров К.С., Крылова Н.В., Майстровская О.С., Борисова О.Н., Д. Гниель // Биопрепараты. – 2004. - Т. 2. - № 14. - С. 24-28.

8. Клинико-иммунологические критерии диагностики клещевых микст инфекций в Приморском крае / Леонова Г.Н., Якушева С.С., Иванис В.А, Дададова О.Б., Крылова Н.В., Симакова А.И., Майстровская О.С. // Эпидемиология и инфекционные болезни. – 2005. - № 4. – С. 25-31.

9. Реактогенность вакцины против клещевого энцефалита «Энцепур®Взрослый» и иммунный ответ на ее введение / Леонова Г.Н., Крылова Н.В., Павленко Е.В., Майстровская О.С. // Медицинская иммунология. – 2005. - Т.7. - №4. – С. 391-396.

10. Оценка серологических методов исследования иммунного ответа у лиц, привитых вакциной против клещевого энцефалита Энцепур®Взрослый / Павленко Е.В., Леонова Г.Н., Крылова Н.В. // Дальневосточный журнал инфекционной патологии. – 2005. - № 5. – С. 33-36.

11. Зависимость специфического иммунного ответа от возраста и пола у лиц, привитых вакциной против клещевого энцефалита / Леонова Г.Н., Павленко Е.В., Крылова Н.В., Майстровская О.С., Ковальчук Н.В. // Медицинская иммунология. – 2006. - Т. 8. - № 1. - С. 73-80.

12. Динамика специфического иммунного ответа у жителей Дальневосточного региона, привитых вакциной против клещевого энцефалита «Энцепур®Взрослый» / Леонова Г.Н., Павленко Е.В., Майстровская О.С., Ковальчук Н.В., Крылова Н.В. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2006. - № 3. - С. 91-94.

13. Продукция цитокинов лейкоцитами крови, инфицированной дальневосточными штаммами вируса клещевого энцефалита / Крылова Н.В., Леонова Г.Н., Майстровская О.С. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 2006. - № 3. - С. 95-99.

14. Влияние реактогенности вакцин против клещевого энцефалита на иммунный ответ у вакцинированных людей / Леонова Г.Н., Крылова Н.В, Павленко Е.В., Майстровская О.С. // Бюллетень сибирской медицины. – 2006. - Т. 5. - Приложение 1. - С. 73-78.

15. Изменение метаболической активности макрофагов под влиянием вируса клещевого энцефалита / Плехова Н.Г., Сомова Л.М., Дробот Е.И., Крылова Н.В., Леонова Г.Н. // Биохимия. – 2007. - Т. 72. - № 2. - С. 236-246.

16. История и перспективы изучения иммунологических аспектов патогенеза клещевого энцефалита / Крылова Н.В. // Дальневосточный журнал инфекционной патологии. – 2007. - № 11. – С. 46-51.

17. Биологическая и молекулярно-генетическая характеристика дальневосточной популяции вируса КЭ и ее патогенетическое значение / Леонова Г.Н., Беликов С.И., Павленко Е.В., Кулакова Н.В., Крылова Н.В. // Вопросы вирусологии. – 2007. - № 6. – С. 13 -17.

18. Некоторые особенности иммунопатогенеза клещевого энцефалита / Крылова Н.В., Леонова Г.Н. / Тихоокеанский медицинский журнал. - 2007. - № 3. - С. 21-25.

19. NO-образующая активность макрофагов при заражении вирусом клещевого энцефалита / Плехова Н.Г., Сомова Л.М., Крылова Н.В., Леонова Г.Н. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. – 2008. - № 3. - С. 316-320.

20. Динамика цитокинов при антигенемии вируса клещевого энцефалита у лиц после укуса клеща / Крылова Н.В., Леонова Г.Н., Павленко Е.В. // Цитокины и воспаление. – 2008. – Т.7. - №1. - С. 35-39.

21. Сравнительное изучение гуморальных факторов иммунитета у инфицированных вирусом клещевого энцефалита лиц, не вакцинированных и вакцинированных против клещевого энцефалита / Крылова Н.В., Леонова Г.Н., Павленко Е.В., Максема И.Г. // Медицинская иммунология. – 2009. - Т.11. - № 2-3. - С.197-204.

22. Противовирусная активность комплексного препарата розмариновой кислоты, полученной из Zostera asiatica, в отношении возбудителя клещевого энцефалита / Крылова Н.В., Леонова Г.Н., Попов А.М., Артюков А.А., Майстровская О.С., Козловская Э.П. // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2009. - № 3. - С. 86-88.

23. Протективное действие фукоидана из морской бурой водоросли Laminaria japonica при экспериментальном клещевом энцефалите / Макаренкова И.Д., Крылова Н.В., Леонова Г.Н., Беседнова Н.Н., Звягинцева Т.Н., Шевченко Н.М. // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2009. - № 3. - С. 89-92.

24. Изучение активности препарата Люромарин in vitro в отношении вируса клещевого энцефалита / Крылова Н.В., Леонова Г.Н., Майстровская О.С., Попов А.М., Артюков А.А., Козловская Э.П. // Антибиотики и химиотерапия. – 2010. – Т. 55. - № 7-8. – С. 17-19.

25. Оценка иммунного ответа в отдаленные сроки после полного курса вакцинации против клещевого энцефалита / Павленко Е.В., Леонова Г.Н., Майстровская О.С., Крылова Н.В. // Эпидемиология и инфекционные болезни. – 2011. – Т. 9. - № 2. – С. 39-44.

26. Особенности противовирусного иммунного ответа у вакцинированных и невакцинированных пациентов на примере лихорадочной формы клещевого энцефалита / Крылова Н.В., Леонова Г.Н., Павленко Е.В., Запорожец Т.С., Смолина Т.П., Гажа А.К., Новиков Д.В., Ченцова И.В. // Бюллетень СО РАМН. – 2011. - № 4. – С. 79-85.

27. Изучение эффективности препарата Люромарин при экспериментальном клещевом энцефалите у мышей / Крылова Н.В., Леонова Г.Н., Попов А.М., Артюков А.А., Козловская Э.П. // Антибиотики и химиотерапия. – 2011. – Т. 56. - № 7-8. – С. 13-15.

28. Сравнительное изучение противовирусной активности лютеолина и 7, 3׳-дисульфата лютеолина / Крылова Н.В., Попов А.М., Леонова Г.Н., Артюков А.А., Майстровская О.С. / Антибиотики и химиотерапия. – 2011. – Т. 56. - № 11-12. – С. 7-10.

29. Значение дальневосточных штаммов вируса клещевого энцефалита в инфекционной патологии / Леонова Г.Н., Крылова Н.В., Павленко Е.В., Беликов С.И., Кондратьев И.Г. // Здоровье населения и среда обитания. - 2012. - №1.-С.4-6.

30. Индукция апоптоза нейтрофилов вирусом клещевого энцефалита / Плехова Н.Г., Сомова Л.М., Ляпун И.Н., Крылова Н.В., Леонова Г.Н. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. – 2012. – Т. 153. - № 1. – С. 118-122.

31. Комплексная оценка состояния иммунной системы при различных формах клещевого энцефалита в остром периоде / Крылова Н.В., Леонова Г.Н., Павленко Е.В., Запорожец Т.С., Смолина Т.П., Гажа А.К., Новиков Д.В., Ченцова И.В. // Медицинская иммунология. – 2012. - Т. 14. - № 4-5. - С. 313-320.

32. Особенности цитокинового профиля на ранних стадиях инфицирования вирусом клещевого энцефалита у вакцинированных и невакцинированных людей / Крылова Н.В., Леонова Г.Н., Павленко Е.В. // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2012. - № 4. - С. 77-80.

33. Особенности цитокинового профиля мышей, инфицированных различными штаммами вируса клещевого энцефалита / Крылова Н.В., Леонова Г.Н., Павленко Е.В., Майстровская О.С. // Цитокины и воспаление. – 2012. – Т. 11. - № 3. – С. 34 -38.

Монографии:

1.Вакцинопрофилактика клещевого энцефалита / Леонова Г.Н., Павленко Е.В., Крылова Н.В.// Владивосток: ОАО «Приморский полиграфкомбинат», 2006. -100 с.

2.The Cell of Innate Systems in Tick-borne Encephalitis / Plekhova N.G., Somova L.M., Lyapun I.N., Kondrashova N.M., Krylova N.V., Leonova G.N., Pustovalov E.V. // In D. Ruzek (ed.) «Flavivirus Encephalitis». In Tech. – 2011. - P. 167-194.

Патенты:

1. Патент RU 2432959 C1. Заявка: 2010141686/15 от 11.10.2010. Опубликовано: 10.11.2011. Бюл. № 31. Средство, обладающее антиоксидантным, кардиопротекторным, противодиабетическим, противовоспалительным, гепатопротекторным, противоопухолевым и противовирусным действием / Попов А.М., Артюков А.А., Кривошапко О.Н., Крылова Н.В., Леонова Г.Н., Козловская Э.П.

2. Патент RU 2439566 C1. Заявка: 2010138768/15 от 20.09.2010. Опубликовано: 10.01.2012. Бюл. № 1. Способ прогнозирования длительности периода антигенемии вируса клещевого энцефалита / Леонова Г.Н., Крылова Н.В.

3. Патент RU 2466190 C1. Заявка: 2011112215/10 от 30.03.2011. Опубликовано: 10.11.2012. Бюл. № 1. Способ определения степени цитопатогенности вирусов / Плехова Н.Г., Сомова Л.М., Крылова Н.В., Леонова Г.Н., Ляпун И.Н.